Leukozytenzahl im Blut

Prinzip Leukozytenzählung während der Mikroskopie in einer bestimmten Anzahl von Quadraten der Zählkammer und Berechnung ihrer Anzahl in 1 Liter Blut unter Berücksichtigung der Verdünnung des Blutes und des Volumens der Zählkammer.

Reagenz: 3-5% ige Essigsäurelösung, getönt zum Anfärben von Leukozytenkernen mit einigen Tropfen Methylenblaulösung. Die Lösung hat eine blaue Farbe und kann lange aufbewahrt werden.

Der Weg der Entschlossenheit. In ein trockenes Reagenzglas gießen Sie 0,4 ml Essigsäurelösung. 0,02 ml Blut werden mit einem Finger gesammelt (Sie können mit Antikoagulans stabilisiertes venöses Blut verwenden). Wischen Sie die Pipettenspitze ab, blasen Sie anschließend Blut von unten bis zum Ende des Röhrchens, mischen Sie, wählen Sie erneut und blasen Sie die Mischung aus Blut und Reagenz (Pipettieren). Beschriften Sie das Röhrchen und lassen Sie es bis zum Zählen. Lagern Sie eine Mischung von Blut mit einer Essigsäurelösung nicht mehr als 2-4 Stunden.

Das mit Essigsäure in einem Reagenzglas verdünnte Blut wird sorgfältig gemischt und in eine Zählkammer gefüllt. Die gefüllte Kammer wird für 1 Minute in horizontaler Position gelassen, um die weißen Blutkörperchen abzusetzen. Ohne die horizontale Position der Kamera zu ändern, legen sie sie auf den Tisch des Mikroskops und zählen bei geringer Vergrößerung (Okular 10 ×, Linse 8 ×) die weißen Blutkörperchen in 100 großen Quadraten, was 1600 kleinen entspricht.

Zur Erhöhung der Genauigkeit werden Leukozyten in großen Quadraten über das Gitter gezählt und nicht in kleine Quadrate und Streifen unterteilt, beginnend an der oberen linken Ecke des Gitters. Um einen besseren Kontrast zu erzielen, verdunkeln Sie das Sichtfeld, lassen Sie den Kondensator fallen und schließen Sie die Blende. Die Zellen innerhalb des Quadrats, die auf zwei beliebigen Linien liegen, werden gezählt, um dieselbe Zelle nicht zweimal zu zählen.

Die Berechnung der Anzahl der Leukozyten erfolgt nach der Formel:

wobei X die Anzahl der Leukozyten in 1 ul Blut ist; und - die Anzahl der Leukozyten in 100 großen Quadraten; 20 - Blutverdünnung; 100 ist die Anzahl der großen Quadrate; 250 ist der Umrechnungsfaktor pro 1 & mgr; l, da das Volumen eines großen Quadrats 1/250 & mgr; l beträgt (die Seite des Quadrats beträgt 1/5 mm, die Höhe beträgt 1/10 mm).

Um die Anzahl der Leukozyten in 1 µl Blut zu berechnen, wird ihre Anzahl in 100 großen Quadraten mit 50 und in 1 Liter multipliziert. Der resultierende Wert wird mit 106 multipliziert.

Hinweis Bei der Zählung von Leukozyten ist ein Fehler in 6-8% der Fälle unvermeidlich.

1. Bei einer großen Anzahl von Normozyten im peripheren Blut werden sie nach Leukozyten (sowohl Leukozyten als auch Normozyten - kernhaltige Zellen) gezählt. Um die Anzahl der Leukozyten richtig zu bestimmen, sollten von der Gesamtzahl der kernhaltigen Blutzellen die Anzahl der Normozyten abgezogen werden.
2. Die verbleibenden Fehler sind ähnlich wie bei der Berechnung der Anzahl der roten Blutkörperchen in der Zählkammer.

Leukozytenzahl

Die Zählmethode in der Kamera. Entnahme und Verdünnung von Blut, das mit der Röhrenmethode produziert wird. In das Röhrchen (vorzugsweise Vidalevskaya) werden 0,4 ml der Verdünnungsflüssigkeit und 0,02 ml Kapillarblut eingeführt. Die resultierende Verdünnung wird praktisch als 1:20 angesehen. Eine 3-5% ige Lösung von mit Methylenblau gefärbter Essigsäure wird gewöhnlich als Verdünnungsmittel verwendet (Essigsäure lysiert Erythrozyten, Methylenblau färbt die Kerne von Leukozyten). Vor dem Befüllen der Kammer wird das Goryaeva-Röhrchen mit verdünntem Blut gründlich geschüttelt. Die Kammer wird wie bei der roten Blutkörperchenfüllung gefüllt.

Leukozyten sind viel kleiner als Erythrozyten (1–2 pro großes Quadrat), daher werden für die Genauigkeit Zählungen in 100 großen Quadraten (nicht bewertet) vorgenommen. Berechnung: 100 große Quadrate (1600 kleine) werden als Leukozyten gezählt.
Wenn man bedenkt, dass das Volumen eines kleinen Quadrats 1/4000 mm3 beträgt und das Blut 20-fach verdünnt wird, wird die Anzahl der Leukozyten in 1 μl Blut berechnet: 4000 bis 20 und dividiert durch 1600 = a x 1/2. Um den tatsächlichen Gehalt an Leukozyten in 1 & mgr; l Blut zu erhalten, ist es praktisch ausreichend, die in der Berechnung erhaltene Anzahl zu halbieren und 2 Nullen hinzuzufügen. Der durchschnittliche Methodenfehler beträgt ± 7%.

Genauer (2-3% Fehler) und perfekt ist die Anzahl der Leukozyten, die elektronische Geräte verwenden. Die Zählung der Leukozyten in Teilchenzählern erfolgt nach dem gleichen Prinzip wie Erythrozyten. Das Vorblut wird verdünnt und mit einem Reagenz gemischt, das rote Blutkörperchen lysiert. Im Autoanalyzer "Technicon" wird eine Lösung von Essigsäure als solche verwendet, in den Geräten "Culter" und "Celloskop" - Saponin oder Sapoglobin, die verdünnt (1: 500, 1: 700) in isotonischer Natriumchloridlösung (6 Tropfen pro 20 ml) zugegeben werden Zucht).

Die Blutleukozytenzählung wird in gefärbten peripheren Blutabstrichen durchgeführt.
Es ist besser, an der dünnsten Stelle nahe dem Ende des Abstrichs mindestens 200 Zellen (außer bei ausgeprägter Leukopenie) zu zählen, und dann den prozentualen Anteil bestimmter Arten von weißen Blutkörperchen abzuleiten. Es wird empfohlen, in der gleichen Reihenfolge zu zählen: Die Hälfte der Zellen sollte oben, die Hälfte unten am Strich gezählt werden, ohne an den Rand und in die Mitte zu gehen (zickzackförmig) (3-4 Sichtfelder entlang des Strichs, 3-4 Felder rechtwinklig zur Mitte des Striches). dann 3-4 Felder zur Seite parallel zur Kante, wieder rechtwinklig nach oben und so weiter zu einer Seite).

Vorbereitung der Abstriche Sorgfältig gewaschenes und entfettetes Glas (sein Rand) berührt einen Blutstropfen an der Injektionsstelle. Schmieren Sie das Schleifglas, indem Sie es in einem Winkel von 45 ° zum Objektträger vor dem Tropfen ablegen. Nachdem sie das Glas zu diesem Tropfen gebracht haben, warten sie, bis sich das Blut entlang der Kante ausbreitet. Dann führen sie das Glas mit einer schnellen Bewegung vorwärts aus und nehmen es nicht aus dem Objekt, bevor es den gesamten Tropfen ausgetrocknet hat.

Ein richtig gemachter Abstrich hat eine gelbliche Farbe (dünn), reicht nicht an die Ränder des Glases und endet in einer Spur (Schnurrbart).

Trockene Abstriche nach anfänglicher Fixierung. Die beste Fixierung wird in absolutem Methylenalkohol (3-5 Minuten) oder in einer Mischung aus Nikiforov aus gleichen Teilen absolutem Ethanol und Ether (30 Minuten) erzielt.

Zu den wichtigsten hämatologischen Farben gehören Methylenblau und sein Derivat - Azure I (Methylenazure) und Azure II (eine Mischung aus gleichen Teilen Azure I und Methylenblau) bis zu säurehaltigem, wasserlöslichem gelbem Eosin.

● Gemälde von Romanovsky-Giemsa. Romanovsky-Giemsa-Farbe (im Werk hergestellt) hat die folgende Zusammensetzung: Azur II - 3 g, wasserlösliches gelbes Eosin - 0,8 g, Methylalkohol - 250 ml und Glycerin - 250 ml. Die Arbeitslacklösung wird mit einer Rate von 1,5 bis 2 Tropfen des fertigen Lackes pro 1 ml destilliertem Wasser hergestellt. Die Farbe wird auf einen Abstrich mit einer möglicherweise höheren Schicht gegossen; Färbezeit - 30-35 Minuten Nach dieser Zeit werden die Tupfer mit Wasser gewaschen und an der Luft getrocknet. Bei diesem Verfahren ist es möglich, den Kern gut zu unterscheiden, aber die neutrophile Granularität des Cytoplasmas ist viel schlechter, so dass es häufig zum Anfärben eines peripheren Blutausstrichs verwendet wird.

● Kombinierte May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa-Färbung nach Pappenheim. Ein fertiger Farbstoff, ein May-Grunwald-Fixiermittel, bei dem es sich um eine Lösung von Eosinmethylenblau in Methylenalkohol handelt, wird 3 Minuten lang auf einen fixierten Abstrich pipettiert. Nach 3 Minuten wird dem Lack, der die Lösung bedeckt, eine gleiche Menge destilliertes Wasser zugesetzt, und die Färbung wird noch 1 Minute fortgesetzt. Danach wird die Farbe abgewaschen und der Abstrich an der Luft getrocknet. Dann wird der getrocknete Abstrich 8-15 Minuten lang mit einer frisch zubereiteten wässerigen Lösung von Romanovsky-Farbe überstrichen. Diese Methode wird als die beste angesehen, insbesondere für Markpunktionen.

Eine Zunahme der Leukozytenzahl im peripheren Blut über dem normalen Niveau wird als Leukozytose bezeichnet, eine Abnahme wird als Leukopenie bezeichnet. Leukozytose (Leukopenie) ist selten durch eine proportionale Zunahme (Abnahme) der Anzahl von Leukozyten aller Art gekennzeichnet, beispielsweise Leukozytose mit Blutverdickung. In den meisten Fällen steigt die Anzahl (Abnahme) eines beliebigen Zelltyps. Die Zunahme oder Abnahme der Anzahl einzelner Leukozytenarten im Blut kann relativ oder absolut sein, abhängig von der Gesamtzahl der Leukozyten - normal, erhöht oder erniedrigt. Die Veränderung der Anzahl, des Verhältnisses der einzelnen Formen und der Morphologie der Leukozyten hängt von der Art und Virulenz des Erregers, der Art, dem Verlauf und dem Ausmaß des pathologischen Prozesses, der individuellen Reaktion des Organismus ab.

Verfahren zum Zählen von Leukozyten in der Goryaev-Kammer

Weiße Blutkörperchen - weiße Blutkörperchen - spielen beim antimikrobiellen Schutz des Körpers eine wichtige Rolle. Granulozyten phagozytieren Mikroben und zerstören sie mit Hilfe von in Granulat eingeschlossenen Enzymen, Lymphozyten produzieren Antikörper und geben dem Körper Immunantworten.

Die Methode zur Bestimmung der Teströhrchenmethode: In ein Reagenzglas 0,4 ml einer Lösung von Türk (Türks Flüssigkeit enthält Essigsäure zur Zerstörung der roten Blutkörperchen und Methylenblau zum Anfärben von Leukozytenkernen) einfüllen. Verwenden Sie eine Kapillarpipette, um 0,02 ml Blut aus einem frischen Tropfen zu entnehmen, blasen Sie es vorsichtig mit einem Reagenz in ein Reagenzglas und spülen Sie die Pipette ab. Gut mischen Gleichzeitig ist die Blutverdünnung 20-fach. Ein Tropfen verdünnten Blutes wird am Ende eines runden Glasstabes gesammelt und auf den Rand einer polierten Glaskammer aufgebracht.

Die Zählung erfolgt in 100 großen, durchgehenden Quadraten, die zu vier zusammengesetzt sind. Eine kleine Erhöhung verwendet.

Die Ableitung der Zählformelnummer 1.

1. 100 Quadrate enthalten 1600 kleine Quadrate (16x 100)

2. Blutvolumen über dem kleinen Quadrat 1/4000 mm3

3. Blutverdünnung 20 mal

Die Anzahl der Leukozyten in 1 µl Blut = bei -4000-20. = Ax 50

Zum Beispiel: 130 Leukozyten wurden in 100 großen Feldern des Goryaev-Gitters gezählt. In 1 ul Blut beträgt die Anzahl der Leukozyten 130 x 50 = 6500 oder 6,5 bis 10 3.

Um den Gehalt an Leukozyten in 1 Liter Blut zu bestimmen, muss die Anzahl der Leukozyten, ausgedrückt in Tausend, mit 10 9 multipliziert werden.

In unserem Beispiel beträgt die Anzahl der Leukozyten in 1 Liter Blut 6,5 bis 10 9.

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Leukozytenzahl im Blut

Leukozytose kann absolut (wahr) und relativ (umverteilend) sein.

Absolute Leukozytose wird bei akuten entzündlichen Prozessen, Gewebenekrose, akuten bakteriellen Infektionen (mit Ausnahme von Typhus, Brucellose, Tularämie usw.), allergischen Zuständen, malignen Tumoren (mit Gewebezerstörung), geschlossenen Kopfverletzungen und Hämorrhagien, Diabetes beobachtet. urämisches Koma, Schock, akuter Blutverlust, als Hauptreaktion - mit Strahlenkrankheit. Bei Leukämie tritt eine signifikante Zunahme der Leukozytenzahl auf.

Relativ (Redistributiv) ist eine Folge des Erhalts von Leukozyten im Blutfluss von den Organen, die für ihr Depot dienen. Sie tritt nach dem Essen (Nahrungsmittelleukozytose), heißen und kalten Bädern, starken Emotionen (vegetovaskuläre Leukozytose), intensiver Muskelarbeit (myogener Leukozytose) usw. auf.

Leukopenie Leukopenie gilt als Indikator für die Hemmung der Funktionsfähigkeit des Knochenmarks durch Exposition gegenüber toxischen Substanzen (Arsen, Benzol usw.), einigen Medikamenten (Sulfanilamiden, Chloramphenicol, Butadion, Immuno, Cyclophosphamid usw.), Viren (Influenza, Virushepatitis), Masern usw.), Mikroben (Typhus, Brucellose usw.), ionisierende Strahlung, Röntgenstrahlen und Hypersplenismus (erhöhte Milzfunktion).

Leukozytose und Leukopenie sind selten durch eine proportionale Zunahme (Abnahme) der Gesamtzahl an Leukozyten aller Art gekennzeichnet (z. B. Leukozytose mit Blutverdickung); In den meisten Fällen gibt es eine Zunahme (Abnahme) der Anzahl eines beliebigen Zelltyps, daher werden die Ausdrücke "Neutrophilie", "Neutropenie", "Lymphozytose", "Lymphopenie", "Eosinophilie", "Eosinopenie", "Monozytose", "Monocytopenie" verwendet, "Basophilia".

Bei der klinischen Bewertung von Veränderungen der Anzahl der Leukozyten wird dem prozentualen Verhältnis der einzelnen Leukozytenformen, dh der Leukozytenformel, große Bedeutung beigemessen.

Leukozytenblutbild einer gesunden Person:

Relativer Betrag Absoluter Betrag

Basophile …………………….0-1% 0-0.0650 x 10 9 / l

Eosinophile ………………….0,5-5% 0,02-0,30 x 10 9 / l

Neutrophile: - Myelozyten............ 0% fehlen

- erstochen... 1-6% 0,040–0,300 × 10 9 / l

- segmentiert….47-72% 2,0-5,5 x 10 9 / l

Lymphozyten …………………….19-37% 1,2-3,0 x 10 9 / L

Monozyten …………………….3-11% 0,09-0,6 x 10 9 / L

Die Leukozytenzählung wird in gefärbten peripheren Blutabstrichen durchgeführt. Für die korrekte Interpretation der Ergebnisse der Studie der Leukozytenformel wird empfohlen, in absoluten Mengen zu zählen, jedoch nicht in relativen. Die verbreitetsten Malmethoden von Romanovsky-Giemsa, Pappenheim. Beim Eintauchen werden mindestens 200 Zellen gezählt und anschließend das prozentuale Verhältnis bestimmter Leukozytenarten abgeleitet. Die Analyse des Leukogramms unter Berücksichtigung anderer Blutparameter und des Krankheitsbildes ist eine wertvolle Untersuchungsmethode, sie hilft bei der Diagnose und Bestimmung der Prognose der Krankheit.

Die Hauptursachen für Neutrophilie.

Akute bakterielle Infektionen - lokalisiert und verallgemeinert.

Entzündung oder Nekrose des Gewebes.

Medizinische Wirkungen (Kortikosteroide).

Die Hauptursachen für Neutropenie.

Infektionen - bakterielle Erkrankungen (Typhus, Brucellose, Tularämie, Paratyphus) und Viren (infektiöse Hepatitis, Masern, Influenza, Röteln und andere).

Myelotoxische Wirkungen und Unterdrückung der Granulozytopoese (ionisierende Strahlung; chemische Mittel - Benzol, Anilin, DDT; medizinische Wirkungen - Zytostatika und Immunsuppressiva; Vitamin-B₁₂-Folsäuremangelanämie, akute aleukämische Leukämie, aplastische Anämie).

Antikörper-Exposition (Immunformen) - Überempfindlichkeit gegen Medikamente, Autoimmunkrankheiten (SLE, rheumatoide Arthritis, chronische lymphatische Leukämie), Isoimmun-Manifestationen (hämolytische Erkrankung des Neugeborenen).

Umverteilung und Ablagerung in Organen - Schockzustände, Erkrankungen mit Splenomegalie und Hypersplenismus.

Erbliche Formen (familiäre gutartige chronische Neutropenie).

Die Hauptursachen für Eosinophilie.

Parasitäre Invasionen (Trichinose).

Chronische Hautläsionen - Psoriasis, Pemphigus, Ekzem.

Tumoren (eosinophile Varianten von Leukämie).

Andere Krankheiten - fibroplastische Endokarditis Lefflera, Scharlach.

In der Erholungsphase von Infektionen und entzündlichen Erkrankungen (günstiges prognostisches Zeichen).

Ursachen der Eosinopenie (Aneosinophilie).

Erhöhte Adrenocorticosteroid-Aktivität im Körper.

Die Hauptursachen für Basophilie:

Chronische myeloische Leukämie und Erythrämie.

Die Hauptursachen der Monozytose.

Subakute und chronische bakterielle Infektionen.

Parasitäre Infektionen - Leishmaniose, Malaria.

Hämoblastose - monozytäre Leukämie, Lymphogranulomatose, Lymphome.

Andere Zustände sind SLE, Sarkoidose, rheumatoide Arthritis, infektiöse Monozytose; in der Zeit der Erholung von Infektionen, beim Verlassen der Agranulozytose, nach Splenektomie.

Die Abnahme der Anzahl der Monozyten ist vor allem für die Beurteilung des Lymphozyten-Monozyten-Verhältnisses bei der Lungentuberkulose von Bedeutung.

Die Hauptursachen für Lymphozytose.

Infektionen - akute Viren (infektiöse Mononukleose, Masern, Röteln, Windpocken), chronische Bakterien (Tuberkulose, Syphilis, Brucellose), Protozoen (Toxoplasmose).

Hämoblastose (lymphatische Leukämie, Lymphom).

Andere Krankheiten - Hyperthyreose, Addison-Krankheit, Vitamin B₁₂-Foliummangelanämie, hypo- und aplastische Anämie.

Lymphozytopenie wird bei SLE, Morbus Hodgkin, weit verbreiteter Lymphknoten-Tuberkulose, im Endstadium von Nierenversagen, akuter Strahlenkrankheit, Immunschwäche, Glukokortikoiden beobachtet.

Die Zunahme oder Abnahme der Anzahl bestimmter Arten von Leukozyten im Blut kann relativ oder absolut sein. Wenn sich nur der Prozentsatz einer bestimmten Art von weißen Blutkörperchen ändert, treten relative Neutrophilie, relative Eosinopenie usw. auf. Die Erhöhung oder Abnahme des absoluten Gehalts jeder Art von Leukozyten, d. H. Die Anzahl dieser Zellen pro Volumeneinheit Blut, wird als absolute Neutrophilie, absolute Eosinopenie usw. bezeichnet.

Die Verschiebung der Formel nach links (Erhöhung der Anzahl junger Formen von Neutrophilen) ist ein Zeichen für eine Entzündung oder einen nekrotischen Prozess im Körper.

Die Verschiebung der Leukozytenformel nach rechts ist charakteristisch für Strahlenkrankheit und Vitamin-B₁₂-Folsäuremangelanämie.

Die Abwesenheit oder signifikante Verringerung der Anzahl aller Arten granulärer Leukozyten - Granulozyten (Neutrophile, Eosinophile, Basophile) wird mit dem Begriff Agranulozytose bezeichnet. Abhängig vom Mechanismus des Auftretens werden myelotoxische Wirkungen (Auswirkungen ionisierender Strahlung, Zytostatikaeinnahme) und Immunreaktionen (Hapten und Autoimmun-Agranulozytose) unterschieden.

Leukozyten (Leukozyten)

Leukozyten Quantitative Leukozytenbestimmung. Leukozyten zählen mit der Kamera Goryaeva. Quantitativer Gehalt an Leukozyten. Leukozytose.

Weiße Blutkörperchen

Die Anzahl der Leukozyten im Blut hängt sowohl von der Geschwindigkeit ihrer Entstehung als auch von deren Mobilisierung aus dem Knochenmark ab sowie von ihrer Verwendung und Migration in das Gewebe (zu den Läsionen), die von Lunge und Milz eingefangen werden. Diese Vorgänge wiederum werden von einer Reihe physiologischer Faktoren beeinflusst, und daher ist die Anzahl der Leukozyten im Blut eines gesunden Menschen Schwankungen unterworfen: Sie steigt am Ende des Tages, während körperlicher Anstrengung, emotionaler Belastung, Einnahme von Eiweißnahrung und abrupten Änderungen der Umgebungstemperatur.

Quantitative Leukozytenbestimmung

Leukozyten werden mit der Goryaev-Kamera und mit automatischen Zählern gezählt.

Leukozyten zählen mit der Kamera Goryaeva

Mit der In-vitro-Methode der Blutentnahme zur Zählung von Leukozyten:

• 0,4 ml einer mit Methylenblau gefärbten Lösung von 3-5% Essigsäure werden in das Röhrchen gegossen. Mit einer Kapillarpipette 20 µl Blut aus einem frischen Tropfen entnehmen (20-fache Verdünnung), vorsichtig mit Reagenz in ein Reagenzglas blasen und die Pipette spülen. Gut mischen;
• Ein sauberes und trockenes Deckglas wird auf die Kammer gerieben, so dass sich Regenbogenringe an der Kontaktstelle bilden.
• Blut in einem Reagenzglas verdünnt, gut mischen. Das Ende eines runden Glasstabes nimmt einen Tropfen Blut und bringt es an den Rand des polierten Glases der Kammer;
• Nach dem Befüllen der Kammer wird sie 1 Minute lang zur Sedimentation von Leukozyten stehen gelassen;
• Leukozyten werden bei niedriger Vergrößerung (Objektiv × 8 oder × 9, Okular × 10 oder × 15) mit einem verdunkelten Sichtfeld (mit verringertem Kondensor oder verengter Membran) betrachtet;
• für zufriedenstellende Ergebnisse werden Leukozyten in 100 großen Quadraten gezählt.

Wenn Sie das Volumen eines großen Quadrats und den Verdünnungsgrad des Blutes kennen, ermitteln Sie die Anzahl der Leukozyten in 1 µl und 1 l Blut. Die Seite des großen Quadrats beträgt 1/5 mm, die Fläche beträgt 1/25 mm2, das Raumvolumen oberhalb dieses Quadrats beträgt 1/250 mm3.

Formel zur Zählung der weißen Blutkörperchen:

wobei B die Anzahl der Leukozyten in 100 großen Quadraten ist;
P - der Verdünnungsgrad (20).

Leukozytenzahl

Norm: 4,0–9,0 × 10 9 / L

Die Zunahme der Anzahl der Leukozyten über 9,0 × 10 9 / l wird bezeichnet
Leukozytose, eine Abnahme ihrer Zahl unter 4,0 × 10 9 / l - Leukopenie. Es können jedoch sogar 3,5 × 10 9 in 1 l Leukozyten für eine Anzahl von Individuen die Norm sein. Laut Literatur haben diese Menschen eine erhöhte Immunabwehr und sind seltener krank. Dies scheint darauf zurückzuführen zu sein, dass eine Immunreaktion eine Leukozytenreserve in Geweben vorsieht, in denen 50-60-mal mehr vorhanden sind als in der Blutbahn. Offensichtlich sind bei gesunden Personen mit niedrigen Leukozytenzahlen im peripheren Blut ihre Reserven im Gewebe entsprechend erhöht. Dieses Phänomen wird durch den erblichen und familiären Charakter oder durch eine Zunahme des Einflusses des parasympathischen Nervensystems erklärt.

Leukopenie kann funktionell und organisch sein.
Funktionelle Leukopenie ist mit einer Fehlregulierung der Blutbildung verbunden und wird beobachtet:

• bei einigen bakteriellen und viralen Infektionen (Typhus, Influenza, Pocken, Röteln, Morbus Botkin, Masern);
• unter der Wirkung von Medikamenten (Sulfonamide, Analgetika, Antikonvulsiva, Antithyreose, Zytostatika und andere Arzneimittel);
• während der Muskelarbeit die Einführung von Fremdproteinen, Nerven- und Temperatureffekten, Hunger, hypotonische Zustände;
• Eine falsche Leukozytopenie kann mit einer Leukozytenaggregation während einer Langzeitlagerung von Blut bei Raumtemperatur (mehr als 4 Stunden) verbunden sein.

Organische Leukopenie infolge von Knochenmarkaplasien und deren Ersatz durch Fettgewebe tritt auf, wenn:

• aplastische Anämie;
• Agranulozytose;
• Leukopenische Leukämie;
• einige Formen der Hodgkin-Krankheit;
• ionisierende Strahlung;
• Hypersplenismus (primär und sekundär);
• Kollagenerkrankungen.

Leukozytose

Leukozytose ist die Reaktion des hämatopoetischen Systems auf die Auswirkungen
exogene und endogene Faktoren. Es gibt physiologische und pathologische Leukozytose.

Physiologische Leukozytose ist:

• Verdauungs - nach dem Essen, besonders reich an Eiweiß; Die Anzahl der Leukozyten überschreitet nicht 10,0–12,0 × 10 9 / l und kehrt nach 3-4 Stunden zum Normalzustand zurück.
• bei emotionalem Stress (Adrenalin), schwerer körperlicher Anstrengung, Abkühlung, übermäßiger Sonneneinstrahlung (Sonnenbrand), Verabreichung einer Reihe von Hormonen (Katecholamine, Glucocorticosteroide usw.), in der zweiten Hälfte der Schwangerschaft, während der Menstruation und aufgrund der ungleichen Verteilung der Leukozyten im Blut der Mainstream.

Die pathologische Leukozytose unterscheidet sich in absolut und relativ.

Absolute Leukozytose - ein Anstieg der Leukozytenzahl im Blut auf mehrere Hunderttausend (100,0–600,0 × 10 9 / l und mehr).

• Am häufigsten beobachtet bei Leukämie: bei chronischer Leukämie - in 98-100% der Fälle, bei akuter Leukämie - in 50-60%. Die Veränderung des Leukozytenanteils in Knochenmark und Blutpunktion dient als Grundlage für die Diagnose von Leukämie.

Relative Leukozytose wird beobachtet:

• akute entzündliche und infektiöse Prozesse, mit Ausnahme von Typhus, Influenza, Pocken, Röteln, Morbus Botkin, Masern. Die größte Leukozytose (bis zu 70,0–80,0 × 10 9 / l) wird bei der Sepsis beobachtet;
• unter dem Einfluss toxischer Substanzen (Insektengifte, Endotoxine), ionisierende Strahlung (unmittelbar nach der Bestrahlung);
• infolge der Wirkung von Corticosteroiden, Adrenalin, Histamin, Acetylcholin und Digitalis-Präparaten;
• bei Gewebezerfall (Nekrose), Myokardinfarkt, Thrombose peripherer Arterien mit Gangränentwicklung, Verbrennungen, exsudativer Pleuritis, Perikarditis, Urämie, Leberkoma;
• erheblicher Blutverlust bei Verletzungen, inneren, gynäkologischen und anderen Blutungen.

Die Zunahme der Leukozytenzahl bei Infektionskrankheiten geht meistens mit einer Verschiebung der Leukozytenformel nach links einher

Leukozytenzahl und Leukozytenzahl.

Um Leukozyten zu zählen, wird das Blut in Mischern oder in Reagenzgläsern verdünnt. Verwenden Sie zu diesem Zweck eine 3-5% ige Essigsäurelösung (zur Zerstörung der roten Blutkörperchen), die mit einem beliebigen Anilinfarbstoff getönt ist (zur Anfärbung von Leukozytenkernen). Das Zählgitter wird wie bei der roten Blutkörperchenfüllung gefüllt. Leukozyten werden in 100 großen Quadraten gezählt. Im Goryaev-Raster ist es zweckmäßig, sie in ununterbrochenen Feldern zu zählen (es gibt 100 darauf). Berechnen Sie einen konstanten Multiplikator für die Verdünnung des Blutes und das Flüssigkeitsvolumen über den Quadraten. Bei 20-maliger Zucht sind es 50.

Bei der Arbeit mit Reagenzgläsern gießen sie 0,38 ml Flüssigkeit vor und geben 0,02 ml Blut ab. Um die automatische Zählung in Reagenzgläsern zu berechnen, hämolytieren rote Blutzellen mit Saponin. Die normale Anzahl der weißen Blutkörperchen beträgt 4,3 • 10 9 -11,3 • 10 9 / l oder 4300-11 300 in 1 μl Blut.

Leukozytenzahl berechnet in gefärbten Abstrichen.

Ein guter Abstrich erfüllt die folgenden Anforderungen: Er ist dünn und die Formelemente liegen in einer Schicht darin; In diesem Fall ist der Abstrich gelb und durchscheinend. Ein guter Abstrich ist gleichmäßig und die Zellen werden nicht durch Abstrich beschädigt. Damit das Blut gleichmäßig auf dem Glas liegt, wird es entfettet, indem ein Gasbrenner über der Flamme gebrannt wird oder in einer Mischung aus Alkohol und Äther aufbewahrt wird. Mit dem Ende des Glases berühren sie den frisch freigesetzten kleinen Blutstropfen und breiten ihn ohne Verzögerung auf das Glas aus. Vor dem Anfärben wird der Abstrich durch Eintauchen in Methanol für 3 Minuten, in Ethanol oder seiner Mischung mit Ether für 30 Minuten fixiert. Es gibt eine Reihe anderer Fixierer. Der nach dem Fixieren getrocknete Tupfer wird mit Farbstoff gefüllt.

Um Blutzellen (Definitionen der Leukozytenformel) zu unterscheiden, greifen Sie auf Differenzfärbung zurück. Die am häufigsten verwendete Färbung von Romanovsky-Giemsa. Dieser Farbstoff ist eine Mischung aus schwach sauren (Eosin) und schwach alkalischen (Azure II) Farben. Zellen und ihre Teile nehmen je nach Reaktion des Mediums die eine oder andere Komponente des Farbstoffs in sich wahr: saure (basophile) Substanzen sind azurblau, alkalisch (oxyphil) Eosinrot; Neutral nehmen beide Farben wahr und werden violett.

Leukozytenformel bezieht sich auf den Prozentsatz der einzelnen Formen von Blutleukozyten.

Hinweis: Für eine ausreichend genaue Berechnung müssen mindestens 200 weiße Blutkörperchen betrachtet werden.

Die Zählung erfolgt mit einem Tauchsystem. Aufgrund der Tatsache, dass die Zellen im Abstrich ungleichmäßig angeordnet sind (größere Zellen gehen zu den Rändern), ist es wichtig, eine solche Bewegungsreihenfolge des Abstrichs einzuhalten, in der die Ränder und der mittlere Bereich gleichermaßen betrachtet werden. Eine der beiden Bewegungsarten wird verwendet: Eine von ihnen bewegt den Strich von der Oberkante zur unteren, bewegt ihn um 2 bis 3 Sichtfelder entlang der Kante, geht dann in die entgegengesetzte Richtung zur Oberkante usw. Bei der zweiten Methode bewegen sie sich um 5 von der Kante —6 Felder bis zur Mitte eines Strichs, dann gleich viel zur Seite, dann zurück zum Rand, einige Felder seitlich beiseite stellen und die Bewegung wiederholen, bis 50 Zellen gezählt sind. Betrachten Sie 4 dieser Stellen an den 4 Ecken des Abstrichs. Bei 200 gezählten Zellen wird die Anzahl in zwei Hälften geteilt und die Anzahl der einzelnen weißen Blutzellen bestimmt.

Leukozyten sind Elemente des Blutes, die schnell auf verschiedene äußere Einflüsse und Veränderungen im Körper reagieren. Die Bestimmung der Gesamtzahl der Leukozyten kann von großem diagnostischem Wert sein, da sie den Zustand der blutbildenden Organe oder ihre Reaktion auf schädliche Wirkungen aufzeigt. Die Zunahme der Anzahl der Leukozyten - Leukozytose - ist das Ergebnis der Aktivierung der Leukopoese, eine Abnahme ihrer Anzahl - Leukopenie - kann von der Hemmung der blutbildenden Organe, ihrer Abreicherung und dem erhöhten Abbau von Leukozyten unter der Wirkung von Anti-Leukozyten-Antikörpern abhängen. Die variabelste Gruppe von Leukozyten sind Neutrophile, deren Anzahl mit vielen Infektionen, Intoxikationen und Gewebeabbau zunimmt.

Kennzeichnend für die aktive Neutroposesis ist nicht nur die Zunahme der Gesamtzahl der Neutrophilen im Blut, sondern auch das Auftreten unreifer Formen darin: Die Anzahl der stabtragenden Zellen nimmt zu, junge Neutrophilen treten auf, manchmal sogar Myelozyten. Diese "Verjüngung" der neutrophilen Zusammensetzung wird als Leukozytenverschiebung nach links bezeichnet. Die Schutzfunktion von Neutrophilen wird durch ihre phagozytische Funktion, bakterizide Wirkung und Freisetzung proteolytischer Enzyme bestimmt, die die Resorption nekrotischen Gewebes und die Wundheilung fördern.

In den meisten Fällen tritt eine regenerative Verschiebung auf, wenn entzündliche Prozesse oder Nekrose auftreten. Eine sehr scharfe Linksverschiebung zu Promyelozyten und sogar Myeloblasten mit signifikanter Leukozytose wird als Leukämiereaktion bezeichnet. Die Abnahme der Anzahl der Neutrophilen - absolute Neutropenie - tritt auf, wenn Knochenmark die Exposition gegenüber Toxinen einiger Mikroorganismen (Erreger von Typhus, Brucellose usw.) und Viren, ionisierender Strahlung, einer Reihe von Medikamenten hemmt.

2. Lymphozyten Lymphozytose wird in der Zeit der Erholung von akuten Infektionskrankheiten mit infektiöser Mononukleose, infektiöser Lymphozytose, lymphozytärer Leukämie, Röteln, Brucellose und Thyreotoxikose beobachtet.

Absolute Lymphopenie tritt bei Strahlenkrankheit, systemischen Läsionen des Lymphsystems auf: Lymphom, Lymphosarkom.

3. Eosinophile Sie sind in relativ geringen Mengen (hauptsächlich im Gewebe) im Blut zu finden, ihre Anzahl steigt jedoch bei allergischen Prozessen (Serumkrankheit, Bronchialasthma), helminthischen Invasionen und juckenden Dermatosen manchmal signifikant an.

Eine Abnahme der Zahl der Eosinophilen - Eosinopenie - bis zu ihrem vollständigen Verschwinden wird bei Sepsis, schweren Formen von Tuberkulose, Typhus und schwerer Intoxikation beobachtet.

4. Basophile. Sind Träger wichtiger Mediatoren des Gewebestoffwechsels (Blut "Äquivalente" von Fettgewebezellen). Wenn ein Organismus sensibilisiert wird, nimmt seine Anzahl zu, und wenn das Allergen wieder eingeführt wird, sinkt es infolge seines Zusammenbruchs stark ab.

5. Monozyten Die Zunahme der Anzahl der Monozyten - Monozytose - ist ein Indikator für die Entwicklung von Immunprozessen. Monozyten werden als Analoga von Gewebemakrophagen erkannt. Monozyten treten bei einer Reihe chronischer Erkrankungen auf (Chroniosepsis, Tuberkulose, Syphilis). Monozytopenie wird manchmal bei schweren septischen, hypertoxischen Formen von Typhus beobachtet.

Agranulozyten. Ein besonderes Merkmal von Agranulozyten sind der nicht segmentierte Kern und das basophile (blaue) Zytoplasma.

Lymphozyten sind die kleinsten Leukozyten. Der Kern ist rund, oval oder bohnenförmig; besetzt den größten Teil der Zelle, intensiv gefärbt. Das Zytoplasma der meisten Lymphozyten mit einem schmalen Rand umgibt den Kern, ist hellblau gefärbt und bis zum Kern geklärt.

Monozyten sind die größten der Blutzellen. Großer Kern mit unregelmäßiger Form und relativ heller Farbe. Das Zytoplasma ist eine graublaue, rauchige Farbe, die bis zum Kern nicht geklärt ist

Zusätzlich zu diesen Zellen kommt es im normalen Blut selten vor, und bei Krankheiten können Plasmazellen häufig vorkommen. Sie zeichnen sich durch einen exzentrisch angeordneten, oft radförmigen Aufbau aus. Die Anzahl dieser Zellen nimmt mit bestimmten Infektionskrankheiten, Wundsepsis und multiplem Myelom zu.

Bei der Berechnung der Leukozytenformel werden nicht nur quantitative Verschiebungen, sondern auch qualitative Änderungen der Formelemente berücksichtigt. Früher wurden degenerative Veränderungen in Leukozyten festgestellt. Bei starker Intoxikation wird die Granularität der Neutrophilen reichlich, groß, intensiv gefärbt und wird als toxisch (oder toxogen) bezeichnet. Manchmal werden Blutabstriche in Blutabstrichen gefunden, die wie die Kernsubstanz von Leukozyten gemalt sind. Dies sind die sogenannten Botkin - Humprecht - Schatten - Überreste des Kernchromatins, die auf eine erhöhte Sprödigkeit der Leukozyten hinweisen und zu deren Abbau führen - der Leukozytolyse

99. Methoden zur Bestimmung der Blutgruppe, das Konzept des Rh-Faktors.

1. Bestimmung der Blutgruppe durch Standardseren:

Folgende Ausrüstung ist erforderlich:

o zwei Sätze von Standards der hämagglutinierenden Seren I (0), II (A), III (B) aus zwei verschiedenen Serien und eine Durchstechflasche mit Serum IV (AB)

o Flasche mit isotonischer Natriumchloridlösung mit einer Pipette

o gereinigte, trockene Platte reinigen

o Objektträger

o sterile Nadeln zum Durchstechen des Fingerfleisches

o sterile Mullbälle,

Standardseren für die Bestimmung der Blutgruppe nach dem ABO-System werden mit einer spezifischen Farbmarkierung hergestellt.: I (0) - farblos, II (A) - Blau, III (B) - Rot, IV (AB) - Gelb. Serum bei 4-10 ° C gelagert Das Serum sollte leicht und transparent sein. Das Vorhandensein von Flocken, Sedimenten und Trübungen sind Anzeichen dafür, dass das Serum nicht geeignet ist. Die ersten Anzeichen einer Agglutination sollten spätestens nach 30 Sekunden auftreten.

Die Platte wird durch einen Farbstift in 4 Quadrate unterteilt und im Uhrzeigersinn mit den Quadraten I (0), II (A), III (B) bezeichnet. Ein großer Serumtropfen von zwei Serien I (0), II (A), W (B) wird mit einer Pipette in das entsprechende Quadrat der Platte gegeben. Das Fingerpad wird mit Alkohol behandelt und die Haut wird mit einer Nadel durchstochen. Der erste Blutstropfen wird mit einer Mullkugel entfernt, die nachfolgenden Tropfen in verschiedenen Teilen des Objektträgers werden nacheinander auf die Serumtropfen aufgetragen und gründlich gerührt. Ein Blutstropfen sollte 5-10 mal geringer sein als ein Tropfen Serum. Dann durch Schütteln der Platte das Blut gründlich mit dem Serum mischen. Die vorläufigen Ergebnisse werden nach 3 Minuten ausgewertet, wonach ein Tropfen isotonische Natriumchloridlösung zugegeben wird, die Platte erneut durch Schütteln gemischt wird und nach 5 Minuten eine abschließende Beurteilung der Agglutinationsreaktion durchgeführt wird.

Bei einem positiven Isohämagglutinationstest divergieren die Flocken und Kerne der anhaftenden roten Blutkörperchen nicht, wenn eine isotonische Lösung von Natriumchlorid zugegeben und gerührt wird.

Wenn eine negative Reaktion des Serums auf einer durchsichtigen, gleichmäßig rosafarbenen Platte fällt, enthalten Sie keine Flocken und Körner.

Die folgenden 4 Kombinationen von Agglutinationsreaktionen mit Standardseren der Gruppen I (0), II (A), III (B) sind möglich.

v Alle 3 Seren in beiden Serien agglutinieren nicht. Blutprobe -

Ich gruppiere

v Die Isohämagglutinationsreaktion war mit den P-Gruppen (A) beider Serien der Serumgruppe negativ und mit den Serumgruppen I (0) und III (B) positiv. Blutprobe -

II (A) -Gruppe.

v Die Isohämagglutinationsreaktion ist in beiden Serien mit Serum der III (B) -Gruppe negativ und mit Serum der I (0) - und II (A) -Gruppen positiv. Blutprobe -

III (B) -Gruppe.

v Serum I (0) -, II (A) -, III (B) -Gruppen führen in beiden Serien zu einer positiven Reaktion. Blut gehört zur Gruppe IV (AB). Vor einer solchen Schlussfolgerung ist es jedoch notwendig, eine Isohämagglutinationsreaktion mit Standardserum IV (AB) der Gruppe unter Verwendung des gleichen Verfahrens durchzuführen. Ein negativer Isohämagglutinationstest ermöglicht die endgültige Zuordnung des Testblutes zur IV (AB) -Gruppe.

2. Das Konzept des Rh-Faktors.

Ein weiteres Antigen (Agglutinogen) wurde in den Erythrozyten gefunden, das als Rh-Faktor bezeichnet wurde. Alle Menschen sind in Individuen mit Rh-positivem (Rh +) und Rh-negativem (Rh) Blut unterteilt. Es wurde festgestellt, dass 85% der Menschen in den Erythrozyten den Rh-Faktor enthalten, d. H. Ihr Blut ist Rh-positiv, und 15% enthalten es nicht, d. H. Das Blut dieser Menschen ist Rh-negativ. Für den Rh-Faktor (Rh-Antigen) befindet sich normalerweise kein Anti-Rh-Agglutinin (fertige Antikörper) im Blut. Solche Antikörper erscheinen im Blutserum nur als Ergebnis einer Immunisierung einer Person mit Rh-negativem Blut mit Rh-positiven Erythrozyten. Eine solche Immunisierung tritt aufgrund wiederholter Transfusionen von Rh-positivem Blut an einen Rh-negativen Empfänger oder während der Schwangerschaft einer Frau mit Rh-negativem Rh-positivem Blut auf. Auf diese Weise immunisiert, werden Menschen sensibilisiert: Wenn sie mit Rh-positivem Blut transfundiert werden, entsteht eine schwerwiegende Komplikation - ein Bluttransfusionsschock.

Zählen der Anzahl der Leukozyten und Blutplättchen

Faktoren, die die Korrektheit der Untersuchung von weißen Blutkörperchen beeinflussen

- lange Lagerung von Blut bei Raumtemperatur

Normen des Leukozytengehalts im Blut

Alter Anzahl der Leukozyten

- 1 Tag 11,6 - 22,0

- 1 Woche 8.1.- 14.3

- 1 Monat 7.6 - 12.4

- Erwachsene 4,0 - 9,0

Methoden zur Bestimmung der Leukozytenzahl im Blut.

- Zählen der Leukozytenzahl in der Zählkammer

- Leukozytenzählung in hämatologischen Analysegeräten

Bestimmung der Anzahl der Leukozyten in der Zählkammer.

- Die Leukozyten werden unter einem Mikroskop gezählt, nachdem rote Blutkörperchen in 100 großen Quadraten des Zählgitters aufgelöst und für 1 Liter Blut neu berechnet wurden, basierend auf dem Volumen der Quadrate und der Verdünnung des Blutes. Die Zählung der Leukozyten sollte innerhalb von 2-4 Stunden nach der Blutentnahme erfolgen.

- Wenn im peripheren Blut kernhaltige rote Blutkörperchen vorhanden sind, werden sie nicht lysiert und zusammen mit Leukozyten gezählt. In diesem Fall wird zur Bestimmung der wahren Anzahl von Leukozyten die Anzahl der Zellen in der roten Reihe von der Gesamtzahl der gezählten Zellen abgezogen.

- Zum Beispiel: Die Gesamtzahl der Leukozyten bei der Berechnung in der Kammer (oder im Analysator) -45x109 / l. Bei der Berechnung der Leukozytenformel wurde festgestellt, dass pro 100 Leukozyten 50 Erythroblasten (Normoblasten) vorhanden sind.

Wir berechnen die wahre Anzahl der Leukozyten im Blut:

150 Zellen - 45 x 109 / l

100 Zellen (Leukozyten) - X

X = 100 × 45 × 10 / l / 150 = 30 × 10 / l

Somit beträgt die wahre Anzahl der Leukozyten im Blut 30 x 109 / l.

Die Hauptfehlerquellen bei der Berechnung von Leukozyten in der Kammer:

- Falsches Verhältnis von Blut- und Essigsäurevolumen in einem Reagenzglas.

- Falsch hergestellte Essigsäurelösung (bei einer Konzentration von mehr als 5% können einige Leukozyten lysieren, was zu einer Unterschätzung des Ergebnisses führt).

- Längere Exposition der Probe bei Temperaturen über 28 ° C, was die Lyse von Leukozyten in der Probe beschleunigen und zu einer Unterschätzung des Ergebnisses führen kann.

- Falsche Füllung der Goryaev-Kammer. Wie bei der Berechnung der roten Blutkörperchen muss die Kamera 1 Minute lang stehen, um die Zellen zu setzen.

- Die Goryaev-Kamera wurde nach der vorherigen Definition nicht gut genug gewaschen. In der Kammer verbleibende Leukozyten können die Ergebnisse der Analyse überschätzen.

Thrombozytenzählmethoden

- in der Zählkammer

Jede Gruppe von Methoden hat Vor- und Nachteile.

- Die Zählung der Blutplättchen in der Kammer ist ausreichend genau und erfordert keine Berechnung der Anzahl der roten Blutkörperchen. Andererseits ist diese Methode aufwendiger, da die Plättchen in der nativen Form durch kleine und wenig kontrastierende Elemente dargestellt werden. Der Nachteil der Methode ist die Thrombozytenzählung in den nächsten Stunden nach der Blutentnahme.

- Die Bestimmung der Anzahl der Blutplättchen in Blutausstrichen ist in ihrer Genauigkeit der Kammermethode oder den automatischen Zählern deutlich unterlegen. Fehler beim Zählen in Blutausstrichen können auf schlechte Qualität des Abstrichs und die damit einhergehende ungleichmäßige Verteilung der Blutplättchen zurückzuführen sein, was die Anzahl der roten Blutkörperchen ungenau bestimmt. Ein wesentlicher Nachteil des Verfahrens besteht darin, dass gleichzeitig Blutplättchen und rote Blutkörperchen im Blut gezählt werden müssen. Der Vorteil ist die Fähigkeit, Thrombozyten unabhängig von der Zeit der Blutentnahme jederzeit zu untersuchen.

- Mit der Methode zur Bestimmung von Blutplättchen mit einem Hämatologieanalysator können Sie die Anzahl der Blutplättchen, ihr durchschnittliches Volumen und ihre Volumenverteilung genau bestimmen.

Einheitliche Methode zum Zählen der Anzahl der Blutleukozyten in der Zählkammer;

Methoden zum Zählen der Leukozytenzahl im Blut

Vereinheitlichte 2 Methoden zur Bestimmung der Leukozytenzahl im Blut:

- in der Zählkammer;

- mit hämatologischen Analysegeräten.

Prinzip: Leukozyten werden unter einem Mikroskop in einem bestimmten Volumen der Zählkammer mit konstanter Blutverdünnung nach der Zerstörung der roten Blutkörperchen gezählt.

Reagenz: 3-5% ige Essigsäurelösung, mit einer wässrigen Lösung von Methylenblau getönt, um Leukozytenkeime zu färben und deren Zählung zu erleichtern. Die Lösung ist blau und lagerstabil.

Sonderausstattung: Mikroskop, Zählkammer Goryaeva.

Der Weg der Entschlossenheit. Mit einer Messpipette oder einem automatischen Dispenser werden genau 0,4 ml Essigsäurelösung in das Agglutinationsreagenzglas gegossen und mit 0,02 ml (Sali-Kapillare) Blut versetzt. Waschen Sie die Kapillare mehrmals mit einer Säurelösung und mischen Sie den Inhalt des Röhrchens. Dies führt zu einer 20-fachen Blutverdünnung. Lassen Sie es bis zum Zählen, aber nicht mehr als 2-4 Stunden nach der Blutentnahme. Die Goryaev-Kammer ist für die Arbeit vorbereitet, indem ein Abdeckglas abgewischt wird, so dass Regenbogenringe erscheinen. Schütteln Sie nochmals den Inhalt des Röhrchens gründlich und füllen Sie die Goryaev-Kammer mit dieser Mischung mit einer Pasteur-Pipette oder einem Glasstab mit geschmolzenem Ende. Lassen Sie die gefüllte Zählkammer für eine Minute in horizontaler Position, um die Leukozyten zu sedimentieren. Leukozyten werden in 100 großen, nicht gezeichneten Quadraten der Zählkammer unter den folgenden Bedingungen gezählt: Kondensator wird abgesenkt, Okular 10x oder 15x, Linse 8x. Die Zählung beginnt in der oberen linken Ecke des Goryaev-Kamera-Gitters. Bei der Zählung von Leukozyten richten sie sich nach der Regel: Alle Zellen innerhalb des Quadrats und auf den Begrenzungslinien werden gezählt, wenn sie meistens innerhalb des Quadrats gehen. Zellen, die genau durch eine Trennlinie geschnitten werden, werden nur auf zwei Seiten eines Quadrats gezählt (z. B. links und oben).

Berechnung Verwenden Sie zur Berechnung der Leukozytenzahl in 1 µl Blut die Formel:

- die Anzahl der Leukozyten in 1 mkl Blut;

a - die Anzahl der Leukozyten, berechnet in 100 großen Quadraten;

4000 - Volumenumwandlungsfaktor in 1 µl, bezogen auf das Volumen des kleinen Quadrats, das µl ist;

1600 - die Anzahl der gezählten kleinen Felder;

20 - Blutverdünnung.

Um die Anzahl der Leukozyten in SI-Einheiten (in 1 l Blut) umzuwandeln, wird die resultierende Zahl mit 10 6 multipliziert.

Praktisch zur Bestimmung des Leukozytengehalts in 1 l Blut wird die Anzahl der Leukozyten, die in 100 großen Quadraten der Zählkammer berechnet wird, mit 50 multipliziert, durch 1000 dividiert (d. H. Mit 3 Zeichen nach links in ein Komma übertragen) und mit 10 9 multipliziert.

Methoden zur Zählung von Leukozyten in der Goryaev-Kammer, Indikatornormen und Abweichungen

Die Goryaev-Kammer ist ein Gerät zur Messung der Anzahl von Zellen und Partikeln in einem bestimmten Flüssigkeitsvolumen (Blut, Urin), das aus einem speziellen dicken Objekt und Deckglas besteht.

Eine Glasscheibe hat in der Mitte einen vertieften Bereich, auf den ein Gitter aus 225 großen Quadraten aufgebracht ist. Von diesen Quadraten sind 25 gleichmäßig in 16 kleinere Quadrate unterteilt. Aufgrund dieses Netzvolumens wird die Berechnung genauer als bei anderen Handzählgeräten durchgeführt.

Kameradienst

Nach dem Gebrauch des Instruments wird der Objektträger durch einstündiges Eintauchen in eine 4% ige Formalinlösung oder eine 70% ige Ethanollösung desinfiziert. Danach wird die Kammer gründlich mit destilliertem Wasser gewaschen. Die überschüssige Flüssigkeit wird mit einem weichen Tuch entfernt. Es ist zu beachten, dass die Kamera aufgrund der daran haftenden Fasern nicht mit einem Wattestäbchen abgewischt werden kann. Gelagertes Glas an einem trockenen Ort.

Während der Verwendung der Kamera werden PEs berechnet, die sich innerhalb des Rasterquadrats und auf den oberen und linken Linien des Umfangs befinden. In diesem Fall werden die Partikel, die die rechte und untere Linie des Umfangs während der Berechnung dieser Zelle berühren, nicht berücksichtigt.

Bestimmung von Leukozyten im Blut

Methode zur Leukozytenzählung

Die Berechnung der Anzahl der Leukozyten beginnt mit der Verdünnung von Blut in einer 3-5% igen Lösung von Ethansäure mit Methylblau 20 Mal. Arbeitsmaterial vor dem Gebrauch mit Gaze trocken wischen.

Das Abdeckglas muss vor dem Auftreten von Newtons farbigen Ringen abgewischt werden. Als nächstes wird die Kammer mit verdünntem Blut gefüllt, während die ersten zwei Tropfen auf Filterpapier abgegeben werden. Die Flüssigkeit tritt aufgrund der kapillaren Eigenschaften von Wasser in die Kammer ein. Es ist darauf zu achten, dass beim Füllen nichts in die Rillen fließt. In diesem Fall wird die Flüssigkeit vorsichtig mit Filterpapier entfernt. Lassen Sie dann das Gitter für eine Minute in Ruhe und warten Sie, bis der FE seine Bewegung stoppt.

Die Zählung der weißen Blutkörperchen erfolgt in hundert großen Feldern bei geringer Vergrößerung, dh mit einem Okular 10x und einem Objektiv 8x nach der Regel von Egorov. Die resultierende Zahl wird in der Formel verwendet.

X = (n × 250 × 20) / 100 oder X = n × 50

X - die Anzahl der Leukozyten.

n ist die Zahl, die durch Zählen in der Kammer erhalten wird.

Die Anzahl der Leukozyten wird unter Berücksichtigung der Anzahl der großen Quadrate des Gitters - 100 und der Verdünnung des Blutes - 20 bestimmt.

Wie ist die Anzahl der Leukozyten?

Leukozytenrate und Abnormalitäten

Die Leukozytenrate beim Menschen beträgt 4,0 - 9,0 × 10 & sup6; / l. Oder anders gesagt, etwa 6.000 weiße Blutkörperchen befinden sich in einem Kubikmeter Blut.

Äußere physiologische Faktoren können Abweichungen von der Norm beeinflussen:

• Nahrungsaufnahme vor Blutspende;
• Stress;
• Schwangerschaft oder Menstruation bei Frauen;
• Hypothermie oder Überhitzung;
• Große körperliche Anstrengung vor dem Testen.

Wenn die Anzahl der weißen Blutkörperchen 9,0 × 10⁹ / l übersteigt (Leukozyten sind erhöht), spricht man von Leukozytose. Ein ähnliches Bild zeigt sich bei malignen Blutkrankheiten, Infektionen, Strahlenschäden und Vergiftungen.

Medikamente können auch die Anzahl der Leukozyten erhöhen. Gewebennekrose, starke Blutungen, einschließlich operativer Eingriffe, Nierenkoma, Herzerkrankungen - all dies kann zu Leukozytose führen.

Der Rückgang der Leukozytenzahl unter 3,9 × 10⁹ / l wird als Leukopenie bezeichnet. Bei manchen Menschen ist jedoch eine feste Anzahl von Leukozyten auf 3,5 × 10⁹ / l festgelegt. Es wird angenommen, dass solche Menschen eine Reserve dieser Zellen in den Geweben 50-mal mehr aufrechterhalten als im Blut. Es gibt auch funktionelle Leukopenien nach Verabreichung von Analgetika, Sulfonamiden und anderen Medikamenten, nach langer Muskelarbeit als Folge von Infektionen und Viren (Typhus, Influenza und Masern).

Leukozytenformel

Alle Leukozytenarten bilden die Leukozytenformel. Daran können Sie bestimmte Pathologien erkennen. Die Normen der Formel variieren mit dem Alter und der Lebensperiode einer Person. Die Verschiebung ist bei Frauen während der Schwangerschaft oder nach der Geburt deutlich sichtbar.

Zur Berechnung des Verhältnisses der Typen dieser Zellen werden verschiedene Methoden verwendet. Sie hängen jedoch alle damit zusammen, dass die schwereren Zellen (z. B. Basophile) näher am Rand des Abstrichs liegen und die Lymphozyten wie leichte Zellen in der Mitte bleiben.

• Filipchenko-Methode. Bei diesem Verfahren wird die Berechnung entlang der Quergeraden der Grenze von einem Ende zum anderen durchgeführt. Der Schlaganfall ist mental in drei Teile unterteilt.
• Schilling-Methode. Leukozyten werden in vier Bereichen eines Abstrichs gezählt.

Die erhaltenen Daten werden in der Tabelle aufgezeichnet. Die Anzahl jeder Art von weißen Blutkörperchen wird individuell durch die Formeln berechnet. Markierte die Elemente, die in Sicht kamen. Die Bewertung bleibt bis zu dem Moment erhalten, bis die Summe aller gezählten Zellen 100 beträgt.

Methoden zur Zählung von Leukozyten im Urin

Im Urin wird die Anzahl der Leukozyten in der Zelle Goryaeva Nechiporenko berechnet. Diese Analyse ist zur Überwachung der Nierenerkrankung erforderlich. Die regelmäßige Untersuchung des Urins hilft, die Richtigkeit der Behandlung und die Wirksamkeit der verordneten Therapie zu überwachen.

Urinsammlung

In der Studie befindet sich nur der erste Morgenurin mitten im Wasserlassen. Für den Patienten ist es wichtig, die Grundregeln für das Sammeln dieses Biomaterials zu befolgen. Ein spezielles zusätzliches Training für die Studie ist nicht erforderlich.

Berechnungsmethode

10 ml frisch gesammelter Urin werden drei Minuten lang bei 2,5 Tausend Umdrehungen pro Minute zentrifugiert. Zuvor muss sichergestellt werden, dass der Harn schwach sauer reagiert, um einen teilweisen Zerfall der Zellen zu vermeiden.

Entfernen Sie mit einer Pipette mit schmalem, gezogenem Ende die obere Schicht. In vitro lassen sich je nach Sedimentvolumen 0,5 ml Urin bis 1 ml.

Der Niederschlag wird vorsichtig mit dem Überstand vermischt. Die resultierende Lösung wird verwendet, um die Goryaev-Zählkammer nach einem ähnlichen Prinzip zu füllen, das bei der Berechnung der PV von Blut verwendet wird. Die Kamera bleibt 3 bis 5 Minuten in Ruhe.

Weiße Blutkörperchen müssen mit einem 7-fach Okular und einer 40-fach Linse in großen Quadraten über das gesamte Raster gezählt werden.

Die resultierende Figur wird in der Formel verwendet:

X = (a / 0,9) × (1000 / V)

X - die Anzahl der Leukozyten in 1 ml Urin.

a - die berechnete Menge geteilt durch das Volumen der Kammer in 1 µl Harnsediment.

v - Die für die Studie genommene Urinmenge.

1000 - die Menge an Sediment.

Es ist wichtig! Leukozyten-Norm: In 1 ml Urin nicht mehr als 2 × 10³ weiße Blutkörperchen.

Leukozytenzahl im Blut

In den meisten Fällen wird die Goryaev-Kammer von Labormitarbeitern verwendet, um Blutwerte von Leukozyten zu ermitteln. Die Zählung von Leukozyten in der Goryaev-Kammer ist eine weniger genaue Methode als die Bestimmung von Leukozyten mit elektronischen Geräten. Die Fehlergröße beträgt ± 7%.

Wie erfolgt die Zählung?

1. In das Röhrchen gießen Sie 0,4 Milliliter der Verdünnungsflüssigkeit sowie 0,02 Milliliter Kapillarblut. Fertige Zucht ist gleich 1:20.
2. Als Verdünnungsflüssigkeit wird üblicherweise eine 3 oder 5% ige Essigsäurelösung verwendet. Es ist mit Methylenblau vorgefärbt, das durch Reaktion die Kerne von Leukozyten färbt.
3. Vor dem Füllen der Kammer wird der Goryaev-Schlauch so gründlich wie möglich geschüttelt. Das Befüllen der Kamera ist das gleiche wie beim Zählen der roten Blutkörperchen.

Berechnungsfunktionen

Da die Anzahl der Leukozyten den roten Blutkörperchen deutlich unterlegen ist, wird die Berechnung in 100 großen Feldern durchgeführt. In 100 Quadraten wurde eine Leukozytenzahl berechnet.

Mit einem Volumen eines kleinen Quadrats von 14.000 Kubikmillimetern und einer 20-fachen Blutverdünnung wird die Anzahl der Leukozyten wie folgt berechnet: 4000x20 und dann durch 1600 geteilt. Es ergibt sich 1/2 x a.

Um eine Anzahl weißer Blutkörperchen in 1 µl zu erhalten, sollte die berechnete Zahl durch 2 geteilt werden und zwei weitere Nullen addieren.

Die Abweichung der Leukozyten vom Niveau deutet auf Leukozytose und Leukopenie hin und erfordert eine sofortige eingehende Untersuchung, da mit hoher Wahrscheinlichkeit Tuberkulose, Lungenentzündung, Sepsis, Typhus, Strahlenkrankheit auftreten.