Leukozytenzahl

Die Zählmethode in der Kamera. Entnahme und Verdünnung von Blut, das mit der Röhrenmethode produziert wird. In das Röhrchen (vorzugsweise Vidalevskaya) werden 0,4 ml der Verdünnungsflüssigkeit und 0,02 ml Kapillarblut eingeführt. Die resultierende Verdünnung wird praktisch als 1:20 angesehen. Eine 3-5% ige Lösung von mit Methylenblau gefärbter Essigsäure wird gewöhnlich als Verdünnungsmittel verwendet (Essigsäure lysiert Erythrozyten, Methylenblau färbt die Kerne von Leukozyten). Vor dem Befüllen der Kammer wird das Goryaeva-Röhrchen mit verdünntem Blut gründlich geschüttelt. Die Kammer wird wie bei der roten Blutkörperchenfüllung gefüllt.

Leukozyten sind viel kleiner als Erythrozyten (1–2 pro großes Quadrat), daher werden für die Genauigkeit Zählungen in 100 großen Quadraten (nicht bewertet) vorgenommen. Berechnung: 100 große Quadrate (1600 kleine) werden als Leukozyten gezählt.
Wenn man bedenkt, dass das Volumen eines kleinen Quadrats 1/4000 mm3 beträgt und das Blut 20-fach verdünnt wird, wird die Anzahl der Leukozyten in 1 μl Blut berechnet: 4000 bis 20 und dividiert durch 1600 = a x 1/2. Um den tatsächlichen Gehalt an Leukozyten in 1 & mgr; l Blut zu erhalten, ist es praktisch ausreichend, die in der Berechnung erhaltene Anzahl zu halbieren und 2 Nullen hinzuzufügen. Der durchschnittliche Methodenfehler beträgt ± 7%.

Genauer (2-3% Fehler) und perfekt ist die Anzahl der Leukozyten, die elektronische Geräte verwenden. Die Zählung der Leukozyten in Teilchenzählern erfolgt nach dem gleichen Prinzip wie Erythrozyten. Das Vorblut wird verdünnt und mit einem Reagenz gemischt, das rote Blutkörperchen lysiert. Im Autoanalyzer "Technicon" wird eine Lösung von Essigsäure als solche verwendet, in den Geräten "Culter" und "Celloskop" - Saponin oder Sapoglobin, die verdünnt (1: 500, 1: 700) in isotonischer Natriumchloridlösung (6 Tropfen pro 20 ml) zugegeben werden Zucht).

Die Blutleukozytenzählung wird in gefärbten peripheren Blutabstrichen durchgeführt.
Es ist besser, an der dünnsten Stelle nahe dem Ende des Abstrichs mindestens 200 Zellen (außer bei ausgeprägter Leukopenie) zu zählen, und dann den prozentualen Anteil bestimmter Arten von weißen Blutkörperchen abzuleiten. Es wird empfohlen, in der gleichen Reihenfolge zu zählen: Die Hälfte der Zellen sollte oben, die Hälfte unten am Strich gezählt werden, ohne an den Rand und in die Mitte zu gehen (zickzackförmig) (3-4 Sichtfelder entlang des Strichs, 3-4 Felder rechtwinklig zur Mitte des Striches). dann 3-4 Felder zur Seite parallel zur Kante, wieder rechtwinklig nach oben und so weiter zu einer Seite).

Vorbereitung der Abstriche Sorgfältig gewaschenes und entfettetes Glas (sein Rand) berührt einen Blutstropfen an der Injektionsstelle. Schmieren Sie das Schleifglas, indem Sie es in einem Winkel von 45 ° zum Objektträger vor dem Tropfen ablegen. Nachdem sie das Glas zu diesem Tropfen gebracht haben, warten sie, bis sich das Blut entlang der Kante ausbreitet. Dann führen sie das Glas mit einer schnellen Bewegung vorwärts aus und nehmen es nicht aus dem Objekt, bevor es den gesamten Tropfen ausgetrocknet hat.

Ein richtig gemachter Abstrich hat eine gelbliche Farbe (dünn), reicht nicht an die Ränder des Glases und endet in einer Spur (Schnurrbart).

Trockene Abstriche nach anfänglicher Fixierung. Die beste Fixierung wird in absolutem Methylenalkohol (3-5 Minuten) oder in einer Mischung aus Nikiforov aus gleichen Teilen absolutem Ethanol und Ether (30 Minuten) erzielt.

Zu den wichtigsten hämatologischen Farben gehören Methylenblau und sein Derivat - Azure I (Methylenazure) und Azure II (eine Mischung aus gleichen Teilen Azure I und Methylenblau) bis zu säurehaltigem, wasserlöslichem gelbem Eosin.

● Gemälde von Romanovsky-Giemsa. Romanovsky-Giemsa-Farbe (im Werk hergestellt) hat die folgende Zusammensetzung: Azur II - 3 g, wasserlösliches gelbes Eosin - 0,8 g, Methylalkohol - 250 ml und Glycerin - 250 ml. Die Arbeitslacklösung wird mit einer Rate von 1,5 bis 2 Tropfen des fertigen Lackes pro 1 ml destilliertem Wasser hergestellt. Die Farbe wird auf einen Abstrich mit einer möglicherweise höheren Schicht gegossen; Färbezeit - 30-35 Minuten Nach dieser Zeit werden die Tupfer mit Wasser gewaschen und an der Luft getrocknet. Bei diesem Verfahren ist es möglich, den Kern gut zu unterscheiden, aber die neutrophile Granularität des Cytoplasmas ist viel schlechter, so dass es häufig zum Anfärben eines peripheren Blutausstrichs verwendet wird.

● Kombinierte May-Grunwald-Romanovsky-Giemsa-Färbung nach Pappenheim. Ein fertiger Farbstoff, ein May-Grunwald-Fixiermittel, bei dem es sich um eine Lösung von Eosinmethylenblau in Methylenalkohol handelt, wird 3 Minuten lang auf einen fixierten Abstrich pipettiert. Nach 3 Minuten wird dem Lack, der die Lösung bedeckt, eine gleiche Menge destilliertes Wasser zugesetzt, und die Färbung wird noch 1 Minute fortgesetzt. Danach wird die Farbe abgewaschen und der Abstrich an der Luft getrocknet. Dann wird der getrocknete Abstrich 8-15 Minuten lang mit einer frisch zubereiteten wässerigen Lösung von Romanovsky-Farbe überstrichen. Diese Methode wird als die beste angesehen, insbesondere für Markpunktionen.

Eine Zunahme der Leukozytenzahl im peripheren Blut über dem normalen Niveau wird als Leukozytose bezeichnet, eine Abnahme wird als Leukopenie bezeichnet. Leukozytose (Leukopenie) ist selten durch eine proportionale Zunahme (Abnahme) der Anzahl von Leukozyten aller Art gekennzeichnet, beispielsweise Leukozytose mit Blutverdickung. In den meisten Fällen steigt die Anzahl (Abnahme) eines beliebigen Zelltyps. Die Zunahme oder Abnahme der Anzahl einzelner Leukozytenarten im Blut kann relativ oder absolut sein, abhängig von der Gesamtzahl der Leukozyten - normal, erhöht oder erniedrigt. Die Veränderung der Anzahl, des Verhältnisses der einzelnen Formen und der Morphologie der Leukozyten hängt von der Art und Virulenz des Erregers, der Art, dem Verlauf und dem Ausmaß des pathologischen Prozesses, der individuellen Reaktion des Organismus ab.

Zählen der Anzahl der Leukozyten und Blutplättchen

Faktoren, die die Korrektheit der Untersuchung von weißen Blutkörperchen beeinflussen

- lange Lagerung von Blut bei Raumtemperatur

Normen des Leukozytengehalts im Blut

Alter Anzahl der Leukozyten

- 1 Tag 11,6 - 22,0

- 1 Woche 8.1.- 14.3

- 1 Monat 7.6 - 12.4

- Erwachsene 4,0 - 9,0

Methoden zur Bestimmung der Leukozytenzahl im Blut.

- Zählen der Leukozytenzahl in der Zählkammer

- Leukozytenzählung in hämatologischen Analysegeräten

Bestimmung der Anzahl der Leukozyten in der Zählkammer.

- Die Leukozyten werden unter einem Mikroskop gezählt, nachdem rote Blutkörperchen in 100 großen Quadraten des Zählgitters aufgelöst und für 1 Liter Blut neu berechnet wurden, basierend auf dem Volumen der Quadrate und der Verdünnung des Blutes. Die Zählung der Leukozyten sollte innerhalb von 2-4 Stunden nach der Blutentnahme erfolgen.

- Wenn im peripheren Blut kernhaltige rote Blutkörperchen vorhanden sind, werden sie nicht lysiert und zusammen mit Leukozyten gezählt. In diesem Fall wird zur Bestimmung der wahren Anzahl von Leukozyten die Anzahl der Zellen in der roten Reihe von der Gesamtzahl der gezählten Zellen abgezogen.

- Zum Beispiel: Die Gesamtzahl der Leukozyten bei der Berechnung in der Kammer (oder im Analysator) -45x109 / l. Bei der Berechnung der Leukozytenformel wurde festgestellt, dass pro 100 Leukozyten 50 Erythroblasten (Normoblasten) vorhanden sind.

Wir berechnen die wahre Anzahl der Leukozyten im Blut:

150 Zellen - 45 x 109 / l

100 Zellen (Leukozyten) - X

X = 100 × 45 × 10 / l / 150 = 30 × 10 / l

Somit beträgt die wahre Anzahl der Leukozyten im Blut 30 x 109 / l.

Die Hauptfehlerquellen bei der Berechnung von Leukozyten in der Kammer:

- Falsches Verhältnis von Blut- und Essigsäurevolumen in einem Reagenzglas.

- Falsch hergestellte Essigsäurelösung (bei einer Konzentration von mehr als 5% können einige Leukozyten lysieren, was zu einer Unterschätzung des Ergebnisses führt).

- Längere Exposition der Probe bei Temperaturen über 28 ° C, was die Lyse von Leukozyten in der Probe beschleunigen und zu einer Unterschätzung des Ergebnisses führen kann.

- Falsche Füllung der Goryaev-Kammer. Wie bei der Berechnung der roten Blutkörperchen muss die Kamera 1 Minute lang stehen, um die Zellen zu setzen.

- Die Goryaev-Kamera wurde nach der vorherigen Definition nicht gut genug gewaschen. In der Kammer verbleibende Leukozyten können die Ergebnisse der Analyse überschätzen.

Thrombozytenzählmethoden

- in der Zählkammer

Jede Gruppe von Methoden hat Vor- und Nachteile.

- Die Zählung der Blutplättchen in der Kammer ist ausreichend genau und erfordert keine Berechnung der Anzahl der roten Blutkörperchen. Andererseits ist diese Methode aufwendiger, da die Plättchen in der nativen Form durch kleine und wenig kontrastierende Elemente dargestellt werden. Der Nachteil der Methode ist die Thrombozytenzählung in den nächsten Stunden nach der Blutentnahme.

- Die Bestimmung der Anzahl der Blutplättchen in Blutausstrichen ist in ihrer Genauigkeit der Kammermethode oder den automatischen Zählern deutlich unterlegen. Fehler beim Zählen in Blutausstrichen können auf schlechte Qualität des Abstrichs und die damit einhergehende ungleichmäßige Verteilung der Blutplättchen zurückzuführen sein, was die Anzahl der roten Blutkörperchen ungenau bestimmt. Ein wesentlicher Nachteil des Verfahrens besteht darin, dass gleichzeitig Blutplättchen und rote Blutkörperchen im Blut gezählt werden müssen. Der Vorteil ist die Fähigkeit, Thrombozyten unabhängig von der Zeit der Blutentnahme jederzeit zu untersuchen.

- Mit der Methode zur Bestimmung von Blutplättchen mit einem Hämatologieanalysator können Sie die Anzahl der Blutplättchen, ihr durchschnittliches Volumen und ihre Volumenverteilung genau bestimmen.

Verfahren zum Zählen von Leukozyten in der Goryaev-Kammer

Weiße Blutkörperchen - weiße Blutkörperchen - spielen beim antimikrobiellen Schutz des Körpers eine wichtige Rolle. Granulozyten phagozytieren Mikroben und zerstören sie mit Hilfe von in Granulat eingeschlossenen Enzymen, Lymphozyten produzieren Antikörper und geben dem Körper Immunantworten.

Die Methode zur Bestimmung der Teströhrchenmethode: In ein Reagenzglas 0,4 ml einer Lösung von Türk (Türks Flüssigkeit enthält Essigsäure zur Zerstörung der roten Blutkörperchen und Methylenblau zum Anfärben von Leukozytenkernen) einfüllen. Verwenden Sie eine Kapillarpipette, um 0,02 ml Blut aus einem frischen Tropfen zu entnehmen, blasen Sie es vorsichtig mit einem Reagenz in ein Reagenzglas und spülen Sie die Pipette ab. Gut mischen Gleichzeitig ist die Blutverdünnung 20-fach. Ein Tropfen verdünnten Blutes wird am Ende eines runden Glasstabes gesammelt und auf den Rand einer polierten Glaskammer aufgebracht.

Die Zählung erfolgt in 100 großen, durchgehenden Quadraten, die zu vier zusammengesetzt sind. Eine kleine Erhöhung verwendet.

Die Ableitung der Zählformelnummer 1.

1. 100 Quadrate enthalten 1600 kleine Quadrate (16x 100)

2. Blutvolumen über dem kleinen Quadrat 1/4000 mm3

3. Blutverdünnung 20 mal

Die Anzahl der Leukozyten in 1 µl Blut = bei -4000-20. = Ax 50

Zum Beispiel: 130 Leukozyten wurden in 100 großen Feldern des Goryaev-Gitters gezählt. In 1 ul Blut beträgt die Anzahl der Leukozyten 130 x 50 = 6500 oder 6,5 bis 10 3.

Um den Gehalt an Leukozyten in 1 Liter Blut zu bestimmen, muss die Anzahl der Leukozyten, ausgedrückt in Tausend, mit 10 9 multipliziert werden.

In unserem Beispiel beträgt die Anzahl der Leukozyten in 1 Liter Blut 6,5 bis 10 9.

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Leukozyten (Leukozyten)

Leukozyten Quantitative Leukozytenbestimmung. Leukozyten zählen mit der Kamera Goryaeva. Quantitativer Gehalt an Leukozyten. Leukozytose.

Weiße Blutkörperchen

Die Anzahl der Leukozyten im Blut hängt sowohl von der Geschwindigkeit ihrer Entstehung als auch von deren Mobilisierung aus dem Knochenmark ab sowie von ihrer Verwendung und Migration in das Gewebe (zu den Läsionen), die von Lunge und Milz eingefangen werden. Diese Vorgänge wiederum werden von einer Reihe physiologischer Faktoren beeinflusst, und daher ist die Anzahl der Leukozyten im Blut eines gesunden Menschen Schwankungen unterworfen: Sie steigt am Ende des Tages, während körperlicher Anstrengung, emotionaler Belastung, Einnahme von Eiweißnahrung und abrupten Änderungen der Umgebungstemperatur.

Quantitative Leukozytenbestimmung

Leukozyten werden mit der Goryaev-Kamera und mit automatischen Zählern gezählt.

Leukozyten zählen mit der Kamera Goryaeva

Mit der In-vitro-Methode der Blutentnahme zur Zählung von Leukozyten:

  • 0,4 ml einer mit Methylenblau gefärbten Lösung von 3-5% Essigsäure werden in das Röhrchen gegossen. Mit einer Kapillarpipette 20 µl Blut aus einem frischen Tropfen entnehmen (20-fache Verdünnung), vorsichtig mit Reagenz in ein Reagenzglas blasen und die Pipette spülen. Gut mischen;
  • Ein sauberes und trockenes Deckglas wird auf die Kammer gerieben, so dass sich Regenbogenringe an der Kontaktstelle bilden.
  • Blut in einem Reagenzglas verdünnt, gut mischen. Das Ende eines runden Glasstabes nimmt einen Tropfen Blut und bringt es an den Rand des polierten Glases der Kammer;
  • Nach dem Befüllen der Kammer wird sie 1 Minute lang zur Sedimentation von Leukozyten stehen gelassen;
  • Leukozyten werden bei niedriger Vergrößerung (Objektiv × 8 oder × 9, Okular × 10 oder × 15) mit einem verdunkelten Sichtfeld (mit verringertem Kondensor oder verengter Membran) betrachtet;
  • für zufriedenstellende Ergebnisse werden Leukozyten in 100 großen Quadraten gezählt.

Wenn Sie das Volumen eines großen Quadrats und den Verdünnungsgrad des Blutes kennen, ermitteln Sie die Anzahl der Leukozyten in 1 µl und 1 l Blut. Die Seite des großen Quadrats beträgt 1/5 mm, die Fläche beträgt 1/25 mm2, das Raumvolumen oberhalb dieses Quadrats beträgt 1/250 mm3.

Formel zur Zählung der weißen Blutkörperchen:

wobei B die Anzahl der Leukozyten in 100 großen Quadraten ist;
P - der Verdünnungsgrad (20).

Leukozytenzahl

Norm: 4,0–9,0 × 10 9 / L

Die Zunahme der Anzahl der Leukozyten über 9,0 × 10 9 / l wird bezeichnet
Leukozytose, eine Abnahme ihrer Zahl unter 4,0 × 10 9 / l - Leukopenie. Es können jedoch sogar 3,5 × 10 9 in 1 l Leukozyten für eine Anzahl von Individuen die Norm sein. Laut Literatur haben diese Menschen eine erhöhte Immunabwehr und sind seltener krank. Dies scheint darauf zurückzuführen zu sein, dass eine Immunreaktion eine Leukozytenreserve in Geweben vorsieht, in denen 50-60-mal mehr vorhanden sind als in der Blutbahn. Offensichtlich sind bei gesunden Personen mit niedrigen Leukozytenzahlen im peripheren Blut ihre Reserven im Gewebe entsprechend erhöht. Dieses Phänomen wird durch den erblichen und familiären Charakter oder durch eine Zunahme des Einflusses des parasympathischen Nervensystems erklärt.

Leukopenie kann funktionell und organisch sein.
Funktionelle Leukopenie ist mit einer Fehlregulierung der Blutbildung verbunden und wird beobachtet:

  • bei einigen bakteriellen und viralen Infektionen (Typhus, Influenza, Pocken, Röteln, Morbus Botkin, Masern);
  • unter der Wirkung von Medikamenten (Sulfonamide, Analgetika, Antikonvulsiva, Antithyreose, Zytostatika und andere Arzneimittel);
  • während der Muskelarbeit die Einführung von Fremdproteinen, Nerven- und Temperatureffekten, Hunger, hypotonische Zustände;
  • Eine falsche Leukozytopenie kann mit einer Leukozytenaggregation während einer Langzeitlagerung von Blut bei Raumtemperatur (mehr als 4 Stunden) verbunden sein.

Organische Leukopenie infolge von Knochenmarkaplasien und deren Ersatz durch Fettgewebe tritt auf, wenn:

  • aplastische Anämie;
  • Agranulozytose;
  • Leukopenische Leukämie;
  • einige Formen der Hodgkin-Krankheit;
  • ionisierende Strahlung;
  • Hypersplenismus (primär und sekundär);
  • Kollagenerkrankungen.

Leukozytose

Leukozytose ist die Reaktion des hämatopoetischen Systems auf die Auswirkungen
exogene und endogene Faktoren. Es gibt physiologische und pathologische Leukozytose.

Physiologische Leukozytose ist:

  • Verdauungs - nach dem Essen, besonders reich an Eiweiß; Die Anzahl der Leukozyten überschreitet nicht 10,0–12,0 × 10 9 / l und kehrt nach 3-4 Stunden zum Normalzustand zurück.
  • bei emotionalem Stress (Adrenalin), schwerer körperlicher Anstrengung, Abkühlung, übermäßiger Sonneneinstrahlung (Sonnenbrand), Verabreichung einer Reihe von Hormonen (Katecholamine, Glucocorticosteroide usw.), in der zweiten Hälfte der Schwangerschaft, während der Menstruation und aufgrund der ungleichen Verteilung der Leukozyten im Blut der Mainstream.

Die pathologische Leukozytose unterscheidet sich in absolut und relativ.

Absolute Leukozytose - ein Anstieg der Leukozytenzahl im Blut auf mehrere Hunderttausend (100,0–600,0 × 10 9 / l und mehr).

  • Am häufigsten beobachtet bei Leukämie: bei chronischer Leukämie - in 98-100% der Fälle, bei akuter Leukämie - in 50-60%. Die Veränderung des Leukozytenanteils in Knochenmark und Blutpunktion dient als Grundlage für die Diagnose von Leukämie.

Relative Leukozytose wird beobachtet:

  • akute entzündliche und infektiöse Prozesse, mit Ausnahme von Typhus, Influenza, Pocken, Röteln, Morbus Botkin, Masern. Die größte Leukozytose (bis zu 70,0–80,0 × 10 9 / l) wird bei der Sepsis beobachtet;
  • unter dem Einfluss toxischer Substanzen (Insektengifte, Endotoxine), ionisierende Strahlung (unmittelbar nach der Bestrahlung);
  • infolge der Wirkung von Corticosteroiden, Adrenalin, Histamin, Acetylcholin und Digitalis-Präparaten;
  • bei Gewebezerfall (Nekrose), Myokardinfarkt, Thrombose peripherer Arterien mit Gangränentwicklung, Verbrennungen, exsudativer Pleuritis, Perikarditis, Urämie, Leberkoma;
  • erheblicher Blutverlust bei Verletzungen, inneren, gynäkologischen und anderen Blutungen.

Die Zunahme der Leukozytenzahl bei Infektionskrankheiten geht meistens mit einer Verschiebung der Leukozytenformel nach links einher

Leukozytenzahl

Die Anzahl der Leukozyten wird mit einem automatischen Zähler oder in einer Goryaev-Kammer berechnet. Um die Leukozyten in der Kammer zu zählen, wird eine türkische Flüssigkeit hergestellt - eine Essigsäurelösung, die mit einer wässrigen Lösung von Methylenblau gefärbt ist (0,1 ml einer 0,1% igen Lösung von Methylenblau werden zu 9 ml 10% iger Essigsäure gegeben). In ein Reagenzglas gießen Sie 0,4 ml flüssiges Türk. Nehmen Sie genau 0,02 ml Blut auf und geben Sie es vorsichtig in die Verdünnungsflüssigkeit. Blutverdünnung beträgt 1:20. Gut mischen und 4 Minuten ziehen lassen. Füllen Sie die Kammer Goryaeva, nachdem Sie das Röhrchen vorsichtig mit verdünntem Blut geschüttelt haben. Die Kamera wird zur Ablagerung von Leukozyten 1 Minute auf einer ebenen Fläche belassen. Dann werden Leukozyten bei geringer Vergrößerung des Mikroskops (Linse 8, Okular 10 oder 15) mit einem verdunkelten Sichtfeld gezählt (bei abgesenktem Kondensator oder verengter Blende). Leukozyten befinden sich in 100 nicht offengelegten großen Quadraten, was 1600 kleinen entspricht. Die Ergebnisse der Zellzählung in großen Quadraten fassen zusammen und berechnen deren Anzahl in 1 µl Blut nach folgender Formel:


wobei X die Anzahl der Leukozyten in 1 ul Blut ist; A - Anzahl der Zellen in 100 großen Feldern, 1600 - Anzahl der kleinen Felder; 20 - Blutverdünnung; 4000 ist ein Multiplikator, der ein Volumen von 1 µl Blut ergibt, bezogen auf das Volumen eines kleinen Quadrats (1/4000 µl).

Zählung der Leukozytenformel: Gefärbte periphere Blutausstriche werden untersucht. Eine notwendige Voraussetzung für die korrekte Berücksichtigung der morphologischen Merkmale von Blutzellen ist ein ordnungsgemäß hergestellter und gut gefärbter Blutausstrich. Auf trockenen, sauberen und gut entfetteten Objektträgern wird ein Blutausstrich hergestellt, der in einer Mischung aus Nikiforov (Ethylalkohol 96 º und Diethylether 1: 1) gealtert wird. Nehmen Sie ein Glasobjektiv für lange Kanten, berühren Sie seine Oberfläche mit einem durch die Punktion freigesetzten Blutstropfen (aber nicht mit Haut), oder geben Sie einen Blutstropfen mit einer Mikropipette oder einer Kapillare auf. Eine Glasscheibe wird auf dem Tisch oder in der linken Hand für schmale Kanten gehalten. Tragen Sie mit der rechten Hand das geschliffene Glas mit einem schmalen Rand auf das Glas auf, wobei sich das Blut in einem Winkel von 45 ° links vom Tropfen befindet, und drücken Sie es nach rechts, bis es das Blut berührt. Sie warten, bis sich das Blut über die gesamte Kante des Mattglases verteilt, und führen es dann mit einer schnellen, schnellen Bewegung von rechts nach links, bis der gesamte Tropfen erschöpft ist. Ein Blutstropfen sollte klein und proportioniert sein, so dass der gesamte Abstrich auf dem Glas platziert wird und nicht 1-1,5 cm vor seinem Rand erreicht wird. Ein gut gemachter Abstrich ist dünn, hat eine gelbliche Farbe und endet in einem "Besen". Luftgetrocknete Blutabstriche werden zur Fixierung in Spezialschalen oder in gewöhnliche mit Fixierflüssigkeit gefüllte Gläser (Methylalkohol, Fixierzeit 3-5 Minuten; Ethylalkohol 30 Minuten; Nikiforov-Mischung 20-30 Minuten) gegeben. Feste Präparate werden an der Luft getrocknet und dann mit Romanovsky-Giemsa-Farbstoff angefärbt. Die fertige Lacklösung Romanovsky-Giemsa (Azureosin) verdünnte 1:10 im für die Färbung erforderlichen Volumen. Feste Abstriche werden mit verdünnter Farbe gegossen, die mit einer möglicherweise höheren Schicht auf den Abstrich gegossen wird. Die Färbung dauert je nach Lufttemperatur im Raum 25 bis 45 Minuten. Nach dem Lackieren den Lack mit destilliertem Wasser abwaschen und die Holzstriche zum Trocknen senkrecht in einen Holzständer stellen. Die Mikroskopie der Blutausstriche wird unter Eintauchen bei einer Vergrößerung von 100 × 10 durchgeführt. Die Leukozytenzählung erfolgt entlang einer Zickzacklinie ("Meanderlinie"). Unter Berücksichtigung der Anzahl der einzelnen Leukozytenformen werden 100-200 Zellen gezählt: Stich- und Segmentneutrophile, Eosinophile, Basophile, Monozyten, Lymphozyten. Berechnen Sie den Prozentsatz jedes Zelltyps.

Zählen der absoluten Anzahl von Phagozyten und Lymphozyten Die absolute Anzahl von Phagozyten (Neutrophilen und Monozyten) und Lymphozyten höherer Wirbeltiere wird auf der Grundlage von Daten zur Anzahl der Leukozyten in peripherem Blut und der Leukozytenformel berechnet.

Phagozytischer Funktionstest

Bestimmung des Phagozytenindex und der Phagozytenzahl

Eine große Anzahl von Techniken wurde entwickelt, um die Absorptions- und Verdauungsaktivität von Leukozyten zu bewerten. Alle basieren auf der Fähigkeit von Phagozyten, Fremdpartikel zu absorbieren, aus denen das Testsystem besteht (eine bestimmte Art von Mikroorganismen, Zymosan, Latex - das Objekt der Absorption). Offenbarung wird in vitro oder in vivo durchgeführt. Der allgemeine Ablauf der Bestimmung ist wie folgt: Heparinisiertes oder citriertes frisches Blut (oder Phagozytensuspension) wird mit einem gleichen Volumen suspendierter täglicher mikrobieller Suspension (Saccharomyces cerevisiae, Staphilococcus aureus, S. albus, E. coli, A. nydrophila) oder einem anderen Absorptionsobjekt gemischt. Die Mischung wird vorsichtig gemischt und in einen Thermostat gestellt (37-40 ° C - warmblütig je nach normaler Körpertemperatur, 26 ° C - wärmeliebende Fische und niedriger für kaltliebende Tiere). Nach 15, 30, 45, 60 und 90 Minuten werden Abstriche auf Objektträgern hergestellt, getrocknet, mit Methylalkohol oder einer Nikiforov-Mischung fixiert und gemäß Romanovsky-Giemsa gefärbt. Sie betrachten Abstriche unter Immersion und bestimmen die Phagozytenaktivität - den Prozentsatz der an der Phagozytose beteiligten Phagozyten, den Phagozytenindex - die Anzahl der von einem Phagozytenleukozyten gefangenen Testmikroben, die Phagozytenzahl - die durchschnittliche Anzahl der phagozytischen Objekte pro aktivem Neutrophil. Die Auswertung von Indikatoren zu verschiedenen Zeitintervallen ermöglicht es uns, die Dynamik der Phagozytose abzuschätzen. Normalerweise sollte der Phagozytenindex nach 90 Minuten aufgrund der Verdauung von Mikroben niedriger als nach 45 Minuten und 60 Minuten sein. Bei Verletzung der Verdauung ändert sich nichts.

Bewertung der funktionellen Aktivität von Phagozyten durch die Reduktionsreaktion von Nitro-Tetrazol (NBT-Test)

Dieser Test ist ein Indikator für die bakterizide Funktion von Phagozyten und ermöglicht es Ihnen, deren Fähigkeit zum sauerstoffabhängigen Abtöten zu bewerten. Wenn dieser Abtötungsmechanismus aktiviert ist, wird das Enzym NADPH-Oxidase aktiviert, wodurch reaktive Sauerstoffspezies in Phagozyten auftreten. Die Freisetzung solcher Substanzen in der Zelle wird als Sauerstoffexplosion bezeichnet, die mit dem NBT-Test registriert werden kann. Bei der Formulierung dieses Tests wird die Substanz Nitrosiniumtetrazolium zu den Phagozyten gegeben, sie wird von der Zelle absorbiert und wandelt sich in Gegenwart reaktiver Sauerstoffspezies in eine dunkelblaue gefärbte Substanz Diformazan um. Je mehr dunkelblaue Körnchen auf der Oberfläche oder im Inneren des Phagozyten fixiert sind, desto mehr aktive Sauerstoffformen werden gebildet, desto mehr sauerstoffabhängiges Abtöten.

Der NBT-Test besteht aus zwei Versionen: spontan und induziert. Beim Aufbau eines spontanen NBT-Tests werden Phagozyten in Gegenwart von NST ohne vorherige Aktivierung der Zellen kultiviert, und bei Durchführung des induzierten NBT-Tests wird dem Kulturmedium ein Aktivator der Phagozytenreaktion zugesetzt. Die Einstellung des NBT-Tests in zwei Varianten ermöglicht die Berechnung der Funktionsreserve von Zellen, dh der Differenz zwischen der Anzahl (Intensität) induzierter Diformazan-positiver Zellen und der Anzahl (Intensität) spontaner Diformazan-positiver Zellen. Die Werte des induzierten NBT-Tests charakterisieren die Aktivität von Phagozytenzellen in Gegenwart eines antigenen Stimulus und werden als Kriterium für ihre Bereitschaft zur vollständigen Phagozytose angesehen. Der spontane NBT-Test ermöglicht die Abschätzung des Aktivierungsgrades sauerstoffabhängiger Abtötungsmechanismen nicht aktivierter Phagozyten. Es kennzeichnet den Aktivierungsgrad intrazellulärer mikrobizider Systeme.

Zur Bildung eines spontanen NBT-Tests werden 0,05 ml einer 0,2% igen Lösung von NBT in Kaliumphosphatpuffer (0,1, pH 7,3) und 0,05 ml desselben Puffers zu 0,1 ml Blut gegeben. Parallel dazu wird eine Probe platziert, um den induzierten NBT-Test zu berücksichtigen, bei dem anstelle von 0,05 ml Puffer das gleiche Volumen an Phagozytenaktivator zugesetzt wird (z. B. Pyrogen bei einer Konzentration von 50 & mgr; g / ml). Das Reaktionsgemisch wird in einem Wasserbad bei 37 ° C (30–60 min) thermostatisiert. Mitteldichte Abstriche werden hergestellt, an der Luft getrocknet und in Ethylalkohol oder Nikiforov-Mischung fixiert (20 min), dann mit einer wässrigen Lösung von Neutralrot (0,1%, 1 min) gestrichen.

Nach der Reaktion werden Blutausstriche unter Eintauchen mikroskopiert (100 × Linse, 10 × Okular). Unter 100 Zellen wird der Anteil der aktivierten Neutrophilen (DAN,%), die Diformazan-Granulate enthalten, gezählt. Entsprechend der Menge an Dipherformazan, die in den Zellen abgelagert ist, wird ihre Aktivität in willkürlichen Einheiten bewertet und der Neutrophilen-Aktivierungsindex (IAN, Used Units) wird berechnet:

wo ist HNeg. - die Anzahl der Zellen, die kein Diformazan-Granulat enthalten;

H1 - die Anzahl der Zellen, in denen die Fläche der Diformazan-Ablagerungen weniger als 1/3 der Kernfläche beträgt;

H2 - die Anzahl der Zellen, in denen die Ablagerungen von Diformazan von 1/3 bis zur gesamten Kerngröße reichen;

H3 - die Anzahl der Zellen, in denen Diformazan-Ablagerungen einen größeren Bereich des Kerns einnehmen.

Die Ableitung des Mobilisierungskoeffizienten (KM) erfolgt nach folgender Formel:

Bestimmung von Leukozyten im Blut

Inhalt des Artikels

  • Bestimmung von Leukozyten im Blut
  • Wozu dienen Leukozyten?
  • Wie hoch ist die allgemeine Analyse von Blut bei Frauen?

Die Anzahl der Leukozyten im Blut

Es gibt keine feste Anzahl von Leukozyten, die für alle Menschen die Norm wäre. Diese Zahl variiert mit dem Alter der Person: Je älter die Person ist, desto geringer ist die Anzahl der Leukozyten in ihrem Blut. Die normale Anzahl von Leukozyten bei einem Neugeborenen beträgt 9-30x109 / l. Bei einem Erwachsenen ist diese Zahl dreimal geringer - 4-9x109 / l. Der Indikator für die Menge dieser Partikel im Blut kann je nach Funktionszustand des Körpers und sogar der Tageszeit geringfügig von der Norm abweichen.

So ist im Blut schwangerer Frauen die Anzahl der Leukozyten erhöht. Die Norm steigt beim ersten Mal nach einer Mahlzeit, nach dem Training mit Überhitzung und Abkühlung. Wenn jedoch die Anzahl der Partikel dreimal so groß ist wie die Norm, dann ist dies ein Signal dafür, dass sich eine Krankheit im Körper entwickelt.

Ein Zustand, bei dem der Körper einen hohen Gehalt an Leukozyten hat, wird Leukozytose genannt, und der umgekehrte Zustand wird Leukopenie genannt. Es ist zu beachten, dass die Qualität der Blutentnahme für die Analyse die Anzahl der Leukozyten stark beeinflusst: Der Eingriff muss immer auf leeren Magen durchgeführt werden.

Wie wird die Anzahl der Leukozyten bestimmt?

Um den Blutleukozytenspiegel auf verschiedene Weise zu bestimmen: durch Spenden von Blut, Abstrich, Urin oder Samen.

Es ist sehr wichtig, den Gehalt an weißen Blutkörperchen im Urin während der Schwangerschaft zu überwachen. Hohe Raten deuten auf die Anwesenheit einer Frau im Körper, die ein Kind trägt, entzündliche Prozesse, zum Beispiel Pyelonephritis oder Blasenentzündung, hin.

Vergessen Sie nicht, dass das Endergebnis der Analyse von ihrem ordnungsgemäßen Verhalten abhängt. Daher werden die Ärzte erneut analysiert, bevor sie einer schwangeren Frau wirksame Medikamente verschreiben.

Das folgende Verfahren wird verwendet, um die Anzahl der Leukozyten im Blut, im Samen oder im Urin abzulesen. Ein bestimmter Teil der Flüssigkeit befindet sich in der Apparatur - Zentrifuge. Der Niederschlag wird auf das Glas aufgetragen und unter einem Mikroskop untersucht. Um die Anzahl der Leukozyten zu zählen, wird das Sediment mit einem speziellen Farbstoff angefärbt. Danach wird die scheinbare Anzahl von Leukozyten im Sichtfeld berechnet.

Wenn die Analyse eine Abweichung von der normalen Leukozytenzahl zeigte, ist es notwendig, den Grund für die Zunahme der Anzahl der Partikel zu ermitteln. Einige Krankheiten werden durch Überprüfen der Anzahl der weißen Blutkörperchen diagnostiziert.

Leukozyten, ihre Anzahl und Hauptgruppen. Methoden zur Bestimmung der Leukozytenzahl. Leykoformula und ihr Wert.

Leukozyten: Norm - (4–9) x109 / l Blut. Ihre Anzahl hängt von der Bildungsrate in den Lymphknoten, der Milz und dem Knochenmark, der Mobilisierung aus dem Knochenmark, der Nutzung und der Migration im Gewebe, dem Einfangen durch die Lunge und der Milz sowie den physiologischen Faktoren ab. Die Hauptfunktion von Granulozyten (vorwiegend neutrophilen) Phagozyten ist das Einfangen und Verdauen von Fremdmaterial mit Hilfe von hydrolytischen Enzymen. Bei der Beurteilung der Anzahl der Leukozyten in der Klinik wird die Leukozytenformel verwendet - der Prozentsatz der einzelnen Formen der Leukozyten. Normalerweise ist dieser Wert konstant.

Leukozytenformel

Die Zunahme der Zahl der Leukozyten auf mehrere Zehntausende deutet auf eine Leukozytose hin und wird bei akuten entzündlichen Erkrankungen und Infektionskrankheiten beobachtet, begleitet von einer Verschiebung der Leukozytenformel nach links. Die Zahl der Leukozyten steigt auf mehrere hunderttausend Punkte für Leukämie an. Bei schweren Infektionskrankheiten werden die Veränderungen der neutrophilen Morphologie beobachtet: Degranulation, Vakuolisierung usw. Eine Abnahme der Leukozytenzahl unter 4000 weist auf eine Leukopenie und häufiger auf eine Agranulozytose hin. Die Verringerung der Anzahl der weißen Blutkörperchen kann mit der Verwendung verschiedener Medikamente, einem erhöhten radioaktiven Hintergrund, Verstädterung usw. in Verbindung gebracht werden. Neutropenie manifestiert sich unter dem Einfluss von Zytostatika mit Lupus, rheumatoider Arthritis, Malaria, Salmonellen, Brucellose als spezifischem Syndrom - mit AIDS und Bestrahlung.

Neutrophile Leukozyten. Blutgehalt - 50–75% (2,2–4,2) x109 / l. Durchmesser –10–12 Mikrometer.

Der Kern ist kompakt und besteht aus 3-4 Segmenten, die durch Brücken miteinander verbunden sind. Zytoplasma mit reichlich Sand. Bei Infektionen und Entzündungen übernehmen Neutrophile die Funktion von Makrophagen - Zellen, die zur Phagozytose befähigt sind.

Leukozyten sind eosinophil. Die Rate beträgt 1–5% der Leukozyten (0,1–0,3) × 10 9 / l. Zellen größer als Neutrophile mit einem Durchmesser von bis zu 12 Mikrometern. Der Kern besteht oft aus 2–3 Segmenten. Das Cytoplasma ist leicht basophil und enthält eine große, hell gefärbte Eosin-Granularität, wodurch sich positive Oxidase-, Peroxidase-, Cytochromoxidase-, Succinat-Dehydrogenase- und saure Phosphatase-Reaktionen ergeben. Sie sind zur Phagozytose befähigt, nehmen an der Entgiftung von Proteinprodukten und allergischen Reaktionen des Körpers teil. Eosinophilie ist charakteristisch für Helmintheninfektionen, sie ist im Stadium der Genesung bei Infektionskrankheiten möglich.

Leukozyten basophil Blutgehalt - 0–1% (bis zu 0,06 x 109 / l). Der Durchmesser beträgt 8 bis 12 Mikrometer. Der Kern ist breit und unregelmäßig geformt. Das Zytoplasma enthält ein großes Korn, das sich in violett-schwarzen Tönen metachromatisch verfärbt. Teilnahme an allergischen Reaktionen (sofortige und verzögerte Arten): Histamin und Heparin (eine Gruppe von Heparinozyten) werden produziert.

Monozyten / Makrophagen. Die Rate beträgt 2–10% Leukozyten (0,2–0,55) × 10 9 / l. Größen von 12 bis 20 µm. Der Kern ist groß und locker mit einer ungleichmäßigen Verteilung des Chromatins. Sie zirkulieren nicht lange im Blut, gelangen in Gewebe und verwandeln sich in Makrophagen, die zu Amöbenbewegungen fähig sind. Führende Zellen der körpereigenen Immunantwort. Die Hauptfunktion ist die Endozytose. Sie sind das zentrale Bindeglied des mononukleären Phagozytsystems. Eine Reihe von Cytokin-abhängigen Funktionen wird ausgeführt: hämatopoetische, immunstimulierende, proinflammatorische, immunsuppressive und entzündungshemmende Funktionen.

Makrophagen-Sekretionsprodukte:

Proteasen: Plasminogenaktivator, Kollagenase, Elastase, Angiotensin-Convertase.

Mediatoren der Entzündung und Immunmodulation: Interleukin-1 (IL-1), Tumornekrosefaktor α, Interferonγ, Lysozym, Neutrophilen-Aktivierungsfaktor, Komplementkomponenten C1, C2, C3, C5, Properdin, Faktoren B, D, IL-3, IL -6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-15.

Wachstumsfaktoren: CSF-GM, CSF-G, CSF-M, Fibroblasten-Wachstumsfaktor, transformierender Wachstumsfaktor.

Gerinnungsfaktor und Fibrinolyse-Inhibitoren: V, VII, IX, X, Plasminogen-Inhibitoren, Plasmin-Inhibitoren.

Haftsubstanzen: Fibronektin, Thrombospondin, Proteoglykane.

Kamera-Zählmethode

Entnahme und Verdünnung von Blut, das mit der Röhrenmethode produziert wird. In das Röhrchen (vorzugsweise Vidalevskaya) werden 0,4 ml der Verdünnungsflüssigkeit und 0,02 ml Kapillarblut eingeführt. Die resultierende Verdünnung wird praktisch als 1:20 angesehen. Eine 3-5% ige Lösung von mit Methylenblau gefärbter Essigsäure wird gewöhnlich als Verdünnungsmittel verwendet (Essigsäure lysiert Erythrozyten, Methylenblau färbt die Kerne von Leukozyten). Vor dem Befüllen der Kammer wird das Goryaeva-Röhrchen mit verdünntem Blut gründlich geschüttelt. Die Kammer wird wie bei der roten Blutkörperchenfüllung gefüllt.

Leukozyten sind viel kleiner als Erythrozyten (1–2 pro großes Quadrat), daher werden für die Genauigkeit Zählungen in 100 großen Quadraten (nicht bewertet) vorgenommen.

Berechnung: 100 große Quadrate (1600 kleine) werden als Leukozyten gezählt. In Anbetracht dessen, dass das Volumen eines kleinen Quadrats 1/4000 mm 3 beträgt und das Blut 20-fach verdünnt wird, wird die Anzahl der Leukozyten in 1 μl Blut berechnet: 4000 × 20 und dividiert durch 1600 = a * 1/2. Um den tatsächlichen Gehalt an Leukozyten in 1 & mgr; l Blut zu erhalten, ist es praktisch ausreichend, die in der Berechnung erhaltene Anzahl zu halbieren und 2 Nullen hinzuzufügen. Der durchschnittliche Methodenfehler beträgt ± 7%.

Genauer (2-3% Fehler) und perfekt ist die Anzahl der Leukozyten, die elektronische Geräte verwenden. Die Zählung der Leukozyten in Teilchenzählern erfolgt nach dem gleichen Prinzip wie Erythrozyten. Das Vorblut wird verdünnt und mit einem Reagenz gemischt, das rote Blutkörperchen lysiert. Verwenden Sie im Analysator "Technicon" als solches eine Lösung von Essigsäure, in der Apparatur "Culter" und "Celloskop" - Saponin oder Sapoglobin, die verdünnt (1: 500, 1: 700) in isotonischer Natriumchloridlösung (6 Tropfen pro 20 ml) zugegeben werden Zucht).

12. Funktionen von Granulozyten. Die Rolle von T- und B-Lymphozyten bei der Schaffung spezifischer Immunitätsmechanismen:

Die Hauptzellen des Immunsystems sind T- und B-Lymphozyten, die im Blutkreislauf und im Lymphsystem zirkulieren und sich ständig von einem Organ des Immunsystems zu anderen Organen bewegen und die Fähigkeit haben, in Gewebe auszuweichen, um Schutzfunktionen zu erfüllen (Abb. 1).

Bei Schutzreaktionen der spezifischen Immunität interagieren neben T- und B-Zellen Phagozyten (Granulozyten, Monozyten, Makrophagen), „natürliche Killer“, Mastzellen, Endothel- und Epithelzellen, die die Rolle von Hilfszellen spielen, mit T- und B-Zellen. Lymphozyten.

Die Immunantwort besteht aus einer komplexen Reihe zellulärer Interaktionen, die durch die Aufnahme von fremdem antigenem Material aktiviert werden. Zunächst erfasst der Makrophagen den Körper, der die Antigene trägt. Dann entfernt der Makrophagen einen Teil des Antigens (Peptids) und zeigt es auf seiner Oberfläche an, als würde er es den Immunzellen präsentieren. Die Aktivierung eines Lymphozyten durch ein Antigen führt zur Proliferation und Umwandlung von Lymphozyten.

Lymphozyten sind die einzigen Zellen im Körper, die in der Lage sind, eigene und fremde Antigene spezifisch zu erkennen und durch Aktivierung auf den Kontakt mit einem bestimmten Antigen zu reagieren. Bei einer sehr ähnlichen Morphologie werden Lymphozyten in zwei Populationen unterteilt, die unterschiedliche Funktionen haben und unterschiedliche Proteine ​​produzieren.

Eine der Populationen heißt B-Lymphozyten. Beim Menschen reifen B-Lymphozyten im Knochenmark. B-Lymphozyten erkennen Antigene durch spezifische Immunglobulinrezeptoren, die als reife B-Lymphozyten auf ihren Membranen erscheinen. B-Lymphozyten sind in der Lage, lösliche Protein-, Polysaccharid- und Lipoprotein-Antigene zu erkennen und zu binden.Die Hauptfunktion von B-Lymphozyten ist die spezifische Erkennung des Antigens. Die Erkennung des Antigens führt zur Aktivierung, Proliferation und Umwandlung von B-Lymphozyten in Plasmazellen - Hersteller spezifischer Antikörper - Immunglobuline. So entsteht eine humorale Immunantwort. In den meisten Fällen benötigen B-Lymphozyten T-Lymphozyten in Form aktivierender Zytokinprodukte für die Entwicklung der humoralen Immunantwort.

Eine andere Population wird aufgrund der Differenzierung ihrer Vorläufer im Thymus T-Lymphozyten genannt. T-Lymphozyten erfüllen die wichtigste Funktion der spezifischen Erkennung und Bindung des Antigens. Mit Antigenen aktivierte T-Lymphozyten vermehren sich und wandeln sich in verschiedene Subpopulationen um, die weiter an allen Formen der Immunantwort beteiligt sind. Ein aktivierter T-Lymphozyt produziert und scheidet auch Zytokine aus, die den Prozess der Erhöhung der Anzahl von T-Lymphozyten, B-Lymphozyten und Makrophagen selbst erhöhen.

Unter den reifen T-Lymphozyten gibt es zwei Hauptsubpopulationen: T-Helferzellen (CD4 +) und T-Killerzellen - zytotoxische T-Lymphozyten (CD8 +). Die Bezeichnung "CD" ist ein Merkmal des "Zelloberflächenphänotyps" - "Differenzierungscluster" (von englischen Differenzierungsclustern - CD).

Es gibt eine andere Art von Lymphozyten - große granuläre Lymphozyten, die sich von kleineren T-Zellen und B-Lymphozyten nicht nur durch die Strukturmerkmale, sondern auch durch das Fehlen eines Antigenerkennungsrezeptors unterscheiden. Diese Zellen werden "natürliche Killer" genannt: Sie sind in der Lage, Zielzellen oder Tumorzellen abzutöten, die mit verschiedenen Viren infiziert sind (siehe Tabelle 1).

Tabelle 1. Klassifizierung von menschlichen Lymphozyten

T-Zellen wirken sich auf folgende Objekte destruktiv aus:

1. Maligne Zellen

2. Mit Mikroorganismen infizierte Zellen.

3. Transplantierte Organe und Gewebe.

Die gesamte Zelle ist an dem Angriff beteiligt, daher wird die Antwort als zelluläre Immunität bezeichnet.

Daher gibt es zwei Hauptarten von Immunreaktionen:

· Die zelluläre Immunität ist eine Funktion von T-Lymphozyten.

· Humorale Immunität - unter Beteiligung von B-Lymphozyten.

Es gibt eine weitere Subpopulation von T-Lymphozyten: regulatorische T-Lymphozyten, T-regulatorische Zellen (Treg), T-Suppressoren sind zentrale Regulatoren der Immunantwort. Ihre Hauptfunktion besteht darin, die Stärke und Dauer der Immunantwort durch die Regulierung der Funktion von T-Effektorzellen (T-Helferzellen und T-cytotoxische Zellen) zu steuern.

Abb. 2. Allgemeines Schema der Immunantwort

Das Phänomen der Unterdrückung der Immunantwort war lange bekannt, seine Mechanismen jedoch nicht bekannt. Daher wurde die Existenz spezifischer T-Suppressorzellen vorgeschlagen, die Existenz dieser Zellen wurde jedoch lange Zeit nicht experimentell bestätigt. Erst in den späten 1990er und frühen 2000er Jahren wurde das Vorhandensein bestimmter T-Zellen gezeigt, die durch den Phänotyp CD25 + FOXP3 + charakterisiert wurden und die Immunantwort wirksam unterdrückten.

13. Immunität, ihre unspezifischen und spezifischen Mechanismen:

Adaptive (veraltete, erworbene, spezifische) Immunität hat die Fähigkeit, einzelne Antigene zu erkennen und darauf zu reagieren, ist durch eine klonale Reaktion gekennzeichnet, lymphoide Zellen sind an der Reaktion beteiligt, es gibt ein immunologisches Gedächtnis, Autoaggression ist möglich.

Klassifiziert in aktiv und passiv.

  • Die erworbene aktive Immunität tritt auf, nachdem eine Krankheit aufgetreten ist oder nachdem ein Impfstoff verabreicht wurde.
  • Die erworbene passive Immunität entsteht, wenn vorgefertigte Antikörper in Form von Serum in den Körper eingebracht oder mit Kolostrum der Mutter oder vor der Geburt auf das Neugeborene übertragen werden.

Eine andere Einteilung unterteilt die Immunität in natürlich und künstlich.

  • Die natürliche Immunität umfasst die angeborene Immunität und erworbene aktive (nach Krankheit) sowie die passive Immunität bei der Übertragung von Antikörpern von der Mutter auf das Kind.
  • Künstliche Immunität umfasst erworbene aktive Impfstoffe (Impfstoffverabreichung) und erworbene Passivwerte (Serumverabreichung).

Angeborene (unspezifische) Immunität wird durch die Fähigkeit verursacht, verschiedene Krankheitserreger gemäß dem konservativsten, ihnen gemeinsamen Spektrum der evolutionären Verwandtschaft vor dem ersten Treffen mit ihnen zu identifizieren und zu neutralisieren. Der Nobelpreis für Medizin und Physiologie wurde 2011 für die Erforschung neuer Mechanismen der angeborenen Immunität verliehen (Ralph Steinman, Jules Hoffman und Bruce Byotler).

Es wird hauptsächlich von Zellen der myeloiden Reihe durchgeführt, weist keine strikte Spezifität für Antigene auf, hat keine klonale Antwort und besitzt kein Erinnerungsvermögen für den primären Kontakt mit einem Fremdstoff.

14. Einkerniges phagozytisches System:

Das System der mononukleären Phagozyten (griechisches Monox + lat. Nucleos Nucleus: griechische Pagos verschlingende, absorbierende + Gun-Sutus-Zelle; Synonym: Makrophagen-System, Monozyten-Makrophagen-System) - das physiologische Abwehrsystem von Zellen, die Fremdkörper aufnehmen und verdauen können. Die Zellen, aus denen dieses System besteht, haben einen gemeinsamen Ursprung, sind durch morphologische und funktionelle Ähnlichkeit gekennzeichnet und in allen Körpergeweben vorhanden.

Die Grundlage des modernen Konzepts des Systems mononukleärer Phagozyten ist die von I.I. Mechnikov am Ende des 19. Jahrhunderts und die Lehre des deutschen Pathologen Aschoff (K.A.L. Aschoff) über das retikuloendotheliale System (RES). Ursprünglich wurde das RES morphologisch als ein System von Körperzellen isoliert, die den Vitalfarbstoff Carmin akkumulieren können. Auf dieser Basis wurden Bindegewebshistiozyten, Blutmonozyten, Kupffer-Zellen der Leber sowie retikuläre Zellen der blutbildenden Organe, Endothelzellen von Kapillaren, Nebenhöhlen des Knochenmarks und Lymphknoten dem RES zugeordnet. Mit der Anhäufung von neuem Wissen und der Verbesserung der morphologischen Forschungsmethoden wurde klar, dass Vorstellungen über das retikuloendotheliale System vage und nicht spezifisch sind und in einer Reihe von Bestimmungen einfach falsch sind. Beispielsweise wurde die Rolle einer Quelle von Phagozytenzellen lange Zeit den retikulären Zellen und dem Endothel der Nebenhöhlen des Knochenmarks und der Lymphknoten zugeschrieben, was sich als falsch herausstellte.


Nun wurde festgestellt, dass mononukleäre Phagozyten aus zirkulierenden Blutmonozyten stammen. Monozyten reifen im Knochenmark und gelangen dann in den Blutkreislauf, von wo sie in Gewebe und seröse Hohlräume wandern und zu Makrophagen werden. Retikuläre Zellen erfüllen eine unterstützende Funktion und schaffen die sogenannte Mikroumgebung für hämatopoetische und lymphoide Zellen. Endothelzellen transportieren Substanzen durch die Kapillarwände. Retikuläre Zellen und vaskuläres Endothel stehen in keinem direkten Zusammenhang mit dem Schutzsystem der Zellen. Auf der Konferenz in Leiden, die sich dem Problem der REC widmete, wurde 1969 der Begriff des "retikuloendothelialen Systems" als veraltet angesehen. Stattdessen übernahm sie das Konzept eines Systems mononukleärer Phagozyten. Durch dieses System umfasst Histiozyten Bindegewebe, Kupffer-Zellen der Leber (stellate retikuloendoteliotsity), Alveolarmakrophagen, Lungen-Makrophagen der Lymphknoten, Milz, Knochenmark, pleurale und peritoneale Makrophagen, Osteoclasten in Knochengewebe, Mikroglia Nervengewebe Synoviozyten Synovialmembranen, Hautzellen Langergaisa, pigmentlose granuläre Dendrozyten. Es gibt freie, d.h. Bewegen durch die Gewebe und fixierte (residente) Makrophagen, die einen relativ festen Platz haben.

Makrophagen von Geweben und serösen Hohlräumen haben nach der Rasterelektronenmikroskopie eine nahezu kugelige Form mit einer unebenen, gefalteten Oberfläche, die durch die Plasmamembran gebildet wird (Cytolemma). Unter Kulturbedingungen breiten sich Makrophagen auf der Oberfläche des Substrats aus und nehmen eine abgeflachte Form an. Während der Bewegung bilden sie mehrere polymorphe Pseudopodien.


Ein charakteristisches ultrastrukturelles Merkmal eines Makrophagen ist das Vorhandensein zahlreicher Lysosomen und Phagolysosomen oder verdauungsfördernder Vakuolen im Zytoplasma. Lysosomen enthalten verschiedene hydrolytische Enzyme, die den Verdau des aufgenommenen Materials gewährleisten. Makrophagen sind aktive Sekretionszellen, die Enzyme, Inhibitoren und Komplementkomponenten in die Umwelt abgeben. Das Hauptsekretionsprodukt von Makrophagen ist Lysozym. Aktivierte Makrophagen sezernieren neutrale Proteinasen (Elastase, Kollagenase), Plasminogenaktivatoren, Komplementfaktoren wie C2, C3, C4, C5 sowie Interferon.

Zellen des Systems mononukleärer Phagozyten besitzen eine Anzahl von Funktionen, die auf ihrer Fähigkeit zur Endozytose beruhen, d. H. Aufnahme und Verdauung von Fremdpartikeln und kolloidalen Flüssigkeiten. Dank dieser Fähigkeit erfüllen sie eine Schutzfunktion. Durch Chemotaxis wandern Makrophagen in die Infektions- und Entzündungsherde, wo sie die Phagozytose von Mikroorganismen, deren Abtötung und Verdauung durchführen. Unter chronischen Entzündungsbedingungen können spezielle Formen von Phagozyten auftreten - Epitheloidzellen (z. B. in einem infektiösen Granulom) und riesige, mehrkernige Zellen vom Typ Pirogov-Langkhans und die Art der Fremdkörperzellen. die durch die Fusion einzelner Phagozyten in ein Polykaryon - eine Multi-Core-Zelle - gebildet werden. In Granulomen produzieren Makrophagen Glycoprotein Fibronectin, das Fibroblasci anzieht und zur Entstehung von Sklerose beiträgt.

Zellen Das mononukleäre Phagozytensystem ist an Immunprozessen beteiligt.


Eine Voraussetzung für die Entwicklung einer gerichteten Immunantwort ist daher die primäre Wechselwirkung des Makrophagen mit dem Antigen. Gleichzeitig wird das Antigen vom Makrophagen absorbiert und in die immunogene Form gebracht. Die Immunstimulation von Lymphozyten erfolgt durch direkten Kontakt mit dem das transformierte Antigen tragenden Makrophagen. Die Immunantwort wird im Allgemeinen als komplexe mehrstufige Interaktion von G- und B-Lymphozyten mit Makrophagen durchgeführt.

Makrophagen haben Antitumoraktivität und zeigen zytotoxische Eigenschaften gegen Tumorzellen. Diese Aktivität ist besonders ausgeprägt bei den sogenannten Immunmakrophagen, die die Lyse von Tumorzielzellen bei Kontakt mit sensibilisierten T-Lymphozyten durchführen, die cytophile Antikörper (Lymphokine) tragen.

Zellen des mononukleären Phagozytensystems sind an der Regulation der myeloischen und lymphatischen Hämatopoese beteiligt. So bilden sich Blutinseln im roten Knochenmark, in der Milz, in der Leber und im Dottersack des Embryos um eine bestimmte Zelle - den zentralen Makrophagen, der die Erythropoese der erythroblastischen Insel organisiert. Kupffer-Zellen der Leber sind an der Regulierung des Blutes beteiligt, indem sie Erythropoietin produzieren. Monozyten und Makrophagen produzieren Faktoren, die die Produktion von Monozyten, Neutrophilen und Eosinophilen stimulieren. In der Thymusdrüse (Thymusdrüse) und den Thymusdrüsen abhängigen Zonen der Lymphorgane finden sich sogenannte interdigitierende Zellen - spezifische Stromaelemente, die ebenfalls zu den Systemen mononukleärer Phagozyten gehören, die für die Migration und Differenzierung von Lymphozyten verantwortlich sind.

Die Austauschfunktion von Makrophagen ist ihre Beteiligung am Eisenstoffwechsel.


In der Milz und im Knochenmark führen Makrophagen eine Erythrophagozytose durch, während sich in ihnen Eisen in Form von Hämosiderin und Ferritin ansammelt, die die Krankenschwester mit Erythroblasten wiederverwenden kann.

15. Leukozyten und ihre Arten. Leukopenie:

Leukozytenformel ist der Prozentsatz bestimmter Arten von Leukozyten im peripheren Blut. Die Leukozytenformel wird auf eine bestimmte Art und Weise modifiziert, die für jede spezifische Krankheit typisch ist. Leukozyten mit verschiedenen Erkrankungen, häufig mit Infektionen, ändern sich quantitativ.

Zunahme der Zahl der Leukozyten - Leukozytose, Abnahme - Leukopenie.

Leukozytose kann physiologisch und pathologisch sein, die erste tritt bei gesunden Menschen auf, die zweite - mit einigen schmerzhaften Zuständen. Leukozytose ist eine Veränderung der zellulären Zusammensetzung des Blutes, die durch eine Zunahme der Leukozytenzahl gekennzeichnet ist. Die Leukozytenrate im Blut beträgt 3,5–8,8 × 109 / l. Dieser Indikator kann jedoch je nach Labor und angewandten Methoden nach oben oder unten variieren.

Leukozytose kann physiologisch und pathologisch sein, die erste tritt bei gesunden Menschen auf, die zweite - mit einigen schmerzhaften Zuständen. Zu den physiologischen Krankheiten zählen die Leukozytose des Essens (nach dem Essen), die myogene (nach körperlichem Stress), die Leukozytose von schwangeren Frauen und andere Personen. Sie wird auch bei Nekrose des Gewebes (Myokardinfarkt, Zerfall des Tumors), nach starken Blutungen, Wunden, Kopfverletzungen usw. beobachtet. In der Regel verschwindet die Leukozytose mit der Ursache, die sie verursacht hat. Eine vorübergehende Leukozytose, die durch das Auftreten unreifer Leukozyten im Blut gekennzeichnet ist, wird als Leukoidreaktion bezeichnet.

Leukopenie ist ein Rückgang der Leukozytenzahl im Blut bei einigen infektiösen und anderen Krankheiten sowie infolge von Strahlenschäden, Medikamenteneinnahme oder Reflexeffekten im Knochenmark.

Strahlenschäden, Kontakt mit einer Reihe von Chemikalien (Benzol, Arsen, DDT usw.) führen zu Leukopenie; Einnahme von Medikamenten (Zytostatika, einige Arten von Antibiotika, Sulfonamide usw.). Leukopenie tritt bei viralen und hart fließenden bakteriellen Infektionen auf, Erkrankungen des Blutsystems.

Wenn Leukopenie erforderlich ist, um die Ursache der Erkrankung genau zu bestimmen. Neben Virusinfektionen und Erkrankungen der blutbildenden Organe können Nebenwirkungen allopathischer Arzneimittel zu Leukopenie führen, da eine Reihe von Arzneimitteln toxisch auf das Knochenmark wirken und durch allergische Mechanismen Leukopenie und Agranulozytose verursachen können.

Die Behandlung besteht aus der Verschreibung von Medikamenten, die die Entwicklung neuer Leukozyten oder die Freisetzung reifer weißer Blutkörperchen stimulieren.

16. Regulation der Leukopoese:

Regulierung der Leukopoese. Die Produktion von Leukozyten wird durch Leukopoetine stimuliert, die nach der schnellen Entfernung einer großen Anzahl von Leukozyten aus dem Blut auftreten. Die chemische Beschaffenheit und der Ort der Bildung im Körper von Leukopoetinen wurden noch nicht untersucht. Nukleinsäuren, Gewebe-Abbauprodukte, die während Schädigung und Entzündung auftreten, und einige Hormone wirken stimulierend auf die Leukopoese. Unter dem Einfluss von Hypophysenhormonen - dem adrenocorticotropen Hormon und Wachstumshormon - steigt die Anzahl der Neutrophilen und die Anzahl der Eosinophilen im Blut.

Das Nervensystem spielt eine wichtige Rolle bei der Stimulation der Leukopoese. Die Reizung der Sympathikusnerven führt zu einem Anstieg der neutrophilen Leukozyten im Blut. Eine anhaltende Reizung des Vagusnervs bewirkt eine Umverteilung der Leukozyten im Blut: Ihr Gehalt steigt im Blut der Mesenterialgefäße und nimmt im Blut der peripheren Gefäße ab; Reizung und emotionale Erregung erhöhen die Anzahl der Leukozyten im Blut. Nach dem Essen steigt der Gehalt an Leukozyten im Blut, das in den Gefäßen zirkuliert. Unter diesen Bedingungen sowie während Muskelarbeit und schmerzhaften Reizen gelangen Leukozyten in der Milz und Nebenhöhlen des Knochenmarks in das Blut.